[發(fā)明專利]一種抗乙型肝炎病毒x蛋白抗體酶聯(lián)免疫測(cè)定試劑盒及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410637265.2
• 申請(qǐng)日: 2014-11-12
• 公開（公告）號(hào): CN104297494A
• 公開（公告）日: 2015-01-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張曉東;葉麗虹
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津托普法瑪生物科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68
• 代理公司: 北京泛誠(chéng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11298
• 代理人: 吳立;文琦

1.一種抗乙型肝炎病毒x蛋白抗體酶聯(lián)免疫測(cè)定試劑盒，包括：

1)重組乙型肝炎病毒x蛋白；

2)抗乙型肝炎病毒x蛋白抗體陰、陽(yáng)性對(duì)照品；

3)酶標(biāo)記結(jié)合物；

4)顯色底物；

5)濃縮洗滌液。

2.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述重組乙型肝炎病毒x蛋白序列如SEQ?ID?No.1所示。

3.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，包被所述重組乙型肝炎病毒x蛋白的固相載體為微孔板。

4.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述酶標(biāo)記結(jié)合物為辣根過(guò)氧化物酶或堿性磷酸酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體。

5.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述顯色底物為3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺。

6.權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的試劑盒在檢測(cè)抗乙型肝炎病毒x蛋白抗體中的應(yīng)用。

7.權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的試劑盒在制備用于肝癌診斷的試劑盒中的應(yīng)用。

8.一種制備權(quán)利要求1-5所述試劑盒的方法，其特征在于包括以下步驟:

1)通過(guò)原核載體表達(dá)重組乙型肝炎病毒x蛋白；

2)制備包被所述重組乙型肝炎病毒x蛋白的固相載體；

3)以抗乙型肝炎病毒x蛋白抗體陰、陽(yáng)性血清制備對(duì)照品；

4)以酶標(biāo)記檢測(cè)抗體；

5)配制顯色底物；

6)配制濃縮洗滌液；

7)分裝所述抗乙型肝炎病毒x蛋白抗體陰、陽(yáng)性對(duì)照品、酶標(biāo)記結(jié)合、顯色底物及濃縮洗滌液；

8)組裝為成品。

9.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，制備包被所述重組乙型肝炎病毒x蛋白的固相載體的步驟2)采用以下方法:

1)包被：用0.02M?PH值為8.5的磷酸緩沖液配制成所需濃度的所述重組乙型肝炎病毒x蛋白包被液，并將包被液負(fù)載于固相載體上；

2)封閉：用含5％酪蛋白或5％脫脂奶粉PH值為6.8-7.3，濃度為0.01M的磷酸鹽緩沖液作為封閉液封閉所述固相載體。

10.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述包被重組乙型肝炎病毒x蛋白的固相載體為微孔板、塑料珠、塑料管。

11.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述酶為辣根過(guò)氧化物酶或堿性磷酸酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體；所述顯色底物為3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺。

12.一種用于肝癌診斷的定量檢測(cè)試劑盒，包括相互獨(dú)立的抗乙型肝炎病毒x蛋白抗體定量檢測(cè)單元和甲胎蛋白定量檢測(cè)單元。

13.如權(quán)利要求12所述的試劑盒，其特征在于，所述抗乙型肝炎病毒x蛋白抗體定量檢測(cè)單元至少包括包被抗乙型肝炎病毒x蛋白的固相載體和抗乙型肝炎病毒x蛋白抗體陰、陽(yáng)性對(duì)照品；所述甲胎蛋白定量檢測(cè)單元至少包括包被甲胎蛋白抗體的固相載體和甲胎蛋白陰、陽(yáng)性對(duì)照品。

14.如權(quán)利要求12所述的試劑盒，其特征在于，所述抗乙型肝炎病毒x蛋白抗體定量檢測(cè)單元是如權(quán)利要求1-4所述的抗乙型肝炎病毒x蛋白抗體酶聯(lián)免疫測(cè)定試劑盒。

15.如權(quán)利要求12-14所述的試劑盒在制備用于肝癌診斷的免疫測(cè)定試劑盒中的應(yīng)用。