[發明專利]一種生物酶法從紫蘇餅粕中提取紫蘇多糖的方法在審
| 申請號: | 201410628601.7 | 申請日: | 2014-11-11 |
| 公開(公告)號: | CN104313087A | 公開(公告)日: | 2015-01-28 |
| 發明(設計)人: | 遲宗磊;藏偉功;丁振洋 | 申請(專利權)人: | 濟南凱因生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12P19/14 | 分類號: | C12P19/14;C12P19/04 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 250100 山東省濟南*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 生物酶 紫蘇 餅粕中 提取 多糖 方法 | ||
1.一種生物酶法從紫蘇餅粕中提取紫蘇多糖的方法,包括下述的步驟:
(1)原料預處理
a.?紫蘇用粉碎機粉碎至40?目,裝萃取釜;
b.?用食品級CO2,其純度為99.99%,流量為12L/?小時,設定萃取壓力為20MPa、溫
度為25℃,分離條件是:分離器Ⅰ壓力10KPa、溫度50℃,分離器Ⅱ壓力4KPa、溫度40℃,萃取時間0.5?小時;
c.?提取完畢,收集萃取物,得紫蘇油;
d.?取步驟c?中剩下的殘渣脫水處理至其水分含量為20%,得紫蘇餅粕;
將步驟d中的紫蘇餅粕經烘干至其水分含量為2-4%,再粉碎至80-200目;
(2)酶解
將粉碎后的紫蘇餅粕,加水混勻,紫蘇餅粕與水的重量比例為1:6-12,并加入脂肪酶,脂肪酶的添加量0.3-0.5%,酶解溫度45℃,調pH?5.5,將上述的原料置于微波提取設備中提取,微波的功率為400-600W,頻率為800MHZ,酶解0.1-0.5h;
再加入纖維素酶,纖維素酶的添加量為0.4-0.6%、酶解溫度40℃、pH值5,將上述的原料置于微波提取設備中提取,微波的功率為400-600W,頻率為800MHZ,酶解0.1-0.5h;
再加入木瓜蛋白酶和中性蛋白酶,木瓜蛋白酶的添加量為0.3-0.8%,中性蛋白酶的添加量為0.2-0.5%,酶解溫度為50℃,pH值6.8-7.2,將上述的原料置于微波提取設備中提取,微波的功率為400-600W,頻率為800MHZ,酶解0.1-0.5h,酶解后在100-105℃下滅酶5-10min;
(3)非水溶性多糖轉化
淀粉酶的添加量為0.8-1.2%、酶解溫度40℃、pH值5,酶解1.5-2.0h后,100-105℃滅酶5-10min;將上述的原料置于微波提取設備中提取,微波的功率為400-600W,頻率為800MHZ,酶解0.1-0.5h,酶解后在100-105℃下滅酶5-10min;
(4)離心分離
將酶解后的紫蘇餅粕,離心10-20?min?,離心轉速為4500?rpm,將上清液與沉淀分別收集;
(5)可溶性多糖的提取
取步驟(4)中的上清液過濾去渣,過濾后得到的濾液在60-70℃下濃縮,濃縮至其濃度為60-70%,濃縮液按1:4比例加入95%乙醇沉淀靜置10-20小時、離心10-20?min?,離心轉速為4500?rpm,收集沉淀并用乙醇反復清洗2-3次,冷凍干燥至水分含量為4-6%后,再在-1-4℃下進行粉碎,得可溶性多糖;?
上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的紫蘇餅粕的重量百分比。
2.如權利要求1所述一種生物酶法從紫蘇餅粕中提取紫蘇多糖的方法,其特征在于,所述的脂肪酶的用量為0.4%。
3.如權利要求1所述的一種生物酶法從紫蘇餅粕中提取紫蘇多糖的方法,其特征在于,所述的纖維素酶的用量是0.5%。
4.如權利要求1所述的一種生物酶法從紫蘇餅粕中提取紫蘇多糖的方法,其特征在于,所述的木瓜蛋白酶和中性蛋白酶的添加量為0.5%和0.4%。
5.如權利要求1所述的一種生物酶法從紫蘇餅粕中提取紫蘇多糖的方法,其特征在于,所述的淀粉酶的添加量為1.0%。
6.如權利要求1-4中任一項所述的一種生物酶法從紫蘇餅粕中提取紫蘇多糖的方法,其特征在于,所述的方法包括下述的步驟:
(1)原料預處理
a.紫蘇用粉碎機粉碎至40?目,裝萃取釜;
b.?用食品級CO2,其純度為99.99%,流量為12L/?小時,設定萃取壓力為20MPa、溫
度為25℃,分離條件是:分離器Ⅰ壓力10KPa、溫度50℃,分離器Ⅱ壓力4KPa、溫度40℃,萃取時間0.5?小時;
c.?提取完畢,收集萃取物,得紫蘇油;
d.?取步驟c?中剩下的殘渣脫水處理至其水分含量為20%,得紫蘇餅粕;
將步驟d中的紫蘇餅粕經烘干至其水分含量為3%,再粉碎至100目;
(2)酶解
將粉碎后的紫蘇餅粕,加水混勻,紫蘇餅粕與水的重量比例為1:8,并加入脂肪酶,脂肪酶的添加量0.4%,酶解溫度45℃,調pH?5.5,將上述的原料置于微波提取設備中提取,微波的功率為500W,頻率為800MHZ,酶解0.2h;
再加入纖維素酶,纖維素酶的添加量為0.5%、酶解溫度40℃、pH值5,將上述的原料置于微波提取設備中提取,微波的功率為500W,頻率為800MHZ,酶解0.2h;
再加入木瓜蛋白酶和中性蛋白酶,木瓜蛋白酶的添加量為0.5%,中性蛋白酶的添加量為0.4%,酶解溫度為50℃,pH值7.0,將上述的原料置于微波提取設備中提取,微波的功率為500W,頻率為800MHZ,酶解0.2h,酶解后在100℃下滅酶8min;
(3)非水溶性多糖轉化
淀粉酶的添加量為1.0%、酶解溫度40℃、pH值5,酶解1.8h后,100℃滅酶6min;
(4)離心分離
將酶解后的紫蘇餅粕,離心15?min?,離心轉速為4500?rpm,將上清液與沉淀分別收集;
(5)可溶性多糖的提取
取步驟(4)中的上清液過濾去渣,過濾后得到的濾液在65℃下濃縮,濃縮至其濃度為65%,濃縮液按1:4比例加入95%乙醇沉淀靜置15小時、離心15?min?,離心轉速為4500?rpm,收集沉淀并用乙醇反復清洗2-3次,冷凍干燥至水分含量為5%后,再在-1-4℃下進行粉碎,得可溶性多糖;?
上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的紫蘇餅粕的重量百分比。
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