[發明專利]一種生物酶法從芝麻葉中提取芝麻葉多糖的方法

在審

• 申請號: 201410628563.5
• 申請日: 2014-11-11
• 公開（公告）號: CN104313085A
• 公開（公告）日: 2015-01-28
• 發明（設計）人: 遲宗磊;藏偉功;丁振洋
• 申請（專利權）人: 濟南凱因生物科技有限公司
• 主分類號: C12P19/14
• 分類號: C12P19/14;C12P19/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于多糖提取技術領域，具體涉及一種生物酶法從芝麻葉中提取芝麻葉多糖的方法。

背景技術??????????????????????????

芝麻葉是胡麻科一年生草本植物芝麻，其性平味苦，具有滋養肝、腎、潤燥滑腸功能，能治療病后脫發、津枯血燥、大便秘結、急慢性咽炎等病癥。芝麻葉盛產于黃淮流域。近年來，隨著分子生物學的發展，人們逐漸認識到多糖與蛋白質、核酸一樣，是與生命活動相關的三類生物大分子之一。多糖具有提高免疫能力、降血糖，抗腫瘤、抗病毒等功能，是藥理學研究的熱點。

氧自由基是引起細胞損傷、人體衰老和某些疾病發生的主要原因之一。目前常用的食品抗氧化劑大多是合成品，合成抗氧化劑如果使用不當，會引發食品安全性問題，有的甚至導致畸形、致癌。個別抗氧化劑已被一些國家禁用或限制使用，天然抗氧化劑因具有安全、無毒等優點而引起人們的關注，尋找高效、天然抗氧化劑符合現代人的健康需要，極具開發價值。目前對芝麻葉的研究主要集中在黃酮類化合物方面，對芝麻葉多糖的研究鮮有報道。

目前提取芝麻葉多糖的方法主要是水提法提取工藝，干芝麻葉粉碎→過篩→乙醚脫脂??干燥得脫脂樣品→加適量純水→75℃浸45分鐘→離心→沉淀加蒸餾水進行第二次提取→合并三次離心上清液→活性炭脫色→減壓濃縮→Sevage法脫蛋白→脫蛋白濃縮液中加入乙醇→使其體積分數為80%→沉淀依次用無水乙醇、丙酮和乙醚洗滌→干燥得粗多糖樣品→以水-乙醇重結晶純化2次→60℃烘干得芝麻葉多糖提取物。上述的方法提取得到的多得率并不高，其得率為4.32%。

因此，需要針對上述的方法進行改進，設計一種反應條件溫和且能提高其提取率的從芝麻葉中提取芝麻多糖的方法。

發明內容

為了解決上述的技術問題，本發明提供了一種得率和純度較高的生物酶法從芝麻葉中提取芝麻葉多糖的方法。

本發明生物酶法從芝麻葉中提取芝麻葉多糖的方法是通過下述的技術方案來實現的：

一種生物酶法從芝麻葉中提取芝麻葉多糖的方法，包括下述的步驟：

（1）原料預處理

芝麻葉經烘干至其水分含量為2-4%，再超微粉碎至800-1000目；

（2）酶解

將粉碎后的芝麻葉，加水混勻，芝麻葉與水的重量比例為1：6-12，并加入脂肪酶，脂肪酶的添加量0.3-0.5％，酶解溫度45℃，調pH?5.5，將上述的原料置于微波提取設備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h；

再加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.4-0.6％、酶解溫度40℃、pH值5，將上述的原料置于微波提取設備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h；

再加入無花果蛋白酶和中性蛋白酶，無花果蛋白酶的添加量為0.3-0.8%，中性蛋白酶的添加量為0.2-0.5%，酶解溫度為50℃，pH值6.8-7.2，將上述的原料置于微波提取設備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h，酶解后在100-105℃下滅酶5-10min；

（3）非水溶性多糖轉化

淀粉酶的添加量為1.0-1.2％、酶解溫度40℃、pH值5，酶解1.5-2.0h后，100-105℃滅酶5-10min；

（4）離心分離

將酶解后的芝麻葉，離心10-20?min?，離心轉速為4500?rpm，將上清液與沉淀分別收集；

（5）可溶性多糖的提取

取步驟（4）中的上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在60-70℃下濃縮，濃縮至其濃度為60-70%，濃縮液按1：4比例加入95%乙醇沉淀靜置10-20小時、離心10-20?min?，離心轉速為4500?rpm，收集沉淀并用乙醇反復清洗2-3次，冷凍干燥至水分含量為4-6%后，再在-1-4℃下進行粉碎，得可溶性多糖；?

上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的芝麻葉的重量百分比。

優選的，脂肪酶的用量為0.4%。

優選的，纖維素酶的用量是0.5%。

優選的，淀粉酶的添加量為1.0%。

優選的，一種生物酶法從芝麻葉中提取芝麻葉多糖的方法，包括下述的步驟：

（1）原料預處理

芝麻葉經烘干至其水分含量為2-4%，再超微粉碎至800目；

（2）酶解