[發明專利]一種葉酸偶聯的金納米棒/聚吡咯/四氧化三鐵多功能復合納米診療劑的制備方法

有效

• 申請號: 201410623958.6
• 申請日: 2014-11-07
• 公開（公告）號: CN104436193A
• 公開（公告）日: 2015-03-25
• 發明（設計）人: 何創龍;馮煒;秦明;周小軍;陳良
• 申請（專利權）人: 東華大學
• 主分類號: A61K41/00
• 分類號: A61K41/00;A61K49/00;A61K49/12;A61K47/22;A61P35/00
• 代理公司: 上海泰能知識產權代理事務所 31233
• 代理人: 黃志達

技術領域

本發明屬于納米診療劑領域，特別涉及一種葉酸偶聯的金納米棒/聚吡咯/四氧化三鐵多功能復合納米診療劑的制備方法。

背景技術

腫瘤已經成為導致人類死亡的主要疾病之一，全球每年確診的腫瘤患者數以千萬，死于腫瘤的患者高達百萬人次。目前仍沿用早期的診斷、放療和化療等手段進行腫瘤治療。在一定程度上，傳統的腫瘤化療方法雖然能起到治療腫瘤的效果，但是由于缺乏靶向性，隨著治療的深入會導致患者的免疫力低下，這給患者的身心帶來巨大痛苦。此外，腫瘤是一種多機制的復雜疾病，80％的腫瘤患者在被確診時癌細胞就已經發生轉移。因此，采用新技術提高對腫瘤的預警、早期診斷、轉移監測的能力以及尋找安全、有效和經濟的治療方法已成為目前臨床亟待解決的問題。

納米材料因其獨特的優勢有望解決傳統醫學方法所不能解決的問題，這務必將引起現代醫學診斷和治療的新變革。納米技術與腫瘤醫學相結合形成的納米腫瘤醫學是納米醫學中的新興領域，也是當前各國前沿科技優先發展的核心領域。同時，納米生物醫學的快速發展為開發安全、高效、特異、智能和靶向性的納米探針提供了新的思路。

目前，腫瘤的臨床診斷主要依賴于兩種方法：(1)生物學檢測方法，包括免疫學檢測、免疫組化、基因芯片和聚合酶鏈式反應技術；(2)醫學影像學方法，包括核磁共振成像技術、X-射線計算機斷層成像技術、核醫學成像技術和超聲成像技術等。若將具有先進功能的納米材料以及智能響應性的納米結構應用于腫瘤分子的影像研究，這與傳統的體外診斷相比，不僅能為腫瘤的早期診斷及轉移預警提供強有力的手段，而且還可以為腫瘤的發展過程提供更為直觀且豐富的證據。腫瘤分子影像已經成為納米腫瘤醫學研究中的重中之重。在腫瘤分子影像的基礎上，再結合藥物、光動力或光熱等治療性方法，將創造出集診斷和治療于一體的多功能納米診療劑，這已成為目前納米分子影像學和納米生物醫學領域的研究熱點。

發明內容

本發明提出了一種葉酸偶聯的金納米棒/聚吡咯/四氧化三鐵多功能復合納米診療劑的制備方法，該方法設備裝置簡單，操作簡便，有助于工業化生產；所獲得的復合納米診療劑分散性好，穩定性好，粒徑均一，并具有良好的生物相容性和靶向性。

本發明的一種葉酸偶聯的金納米棒/聚吡咯/四氧化三鐵多功能復合納米診療劑的制備方法，包括：

(1)制備表面活性劑穩定的金納米棒溶液；

(2)將三氯化鐵加入到聚乙烯醇溶液中，加熱充分攪拌，配制成聚合物溶液；

(3)將步驟(1)制備的金納米棒溶液加入到步驟(2)制備的聚合物溶液中，超聲分散，攪拌均勻；

(4)在冰浴條件下將吡咯單體逐滴加入步驟(3)制備的混合溶液中，攪拌10～60min后，置于低溫環境中，保持3～24h，待溶液變成黑色，制得含有金納米棒/聚吡咯復合納米粒子的懸浮液；

(5)將步驟(4)制備的金納米棒/聚吡咯納米粒子的懸浮液，用去離子水和乙醇稀釋，升高溫度，在氮氣保護下，加入氨水溶液，反應10～40min后，再次加入氨水溶液，繼續反應10～40min，得到金納米棒/聚吡咯/四氧化三鐵復合納米診療劑，通過外加磁場，收集粒子；

(6)配制陽離子型聚電解質殼聚糖溶液和陰離子型聚電解質海藻酸鈉溶液，然后依次分別加入到步驟(5)制備的粒子溶液中，離心洗滌分散，再分別加入殼聚糖和海藻酸鈉溶液，攪拌0.2～2小時，離心洗滌分散，循環3～5遍，即層層自組裝；

(7)將羥基琥珀酰亞胺、N-(3-二甲氨基丙基)-N'-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和葉酸溶于去離子水中；

(8)收集步驟(6)制備的納米粒子，分散在去離子水中，加入到步驟(7)溶液中，用三乙胺做催化劑，調節pH后，攪拌2～24h，離心收集洗滌，即得葉酸偶聯的金納米棒/聚吡咯/四氧化三鐵多功能復合納米診療劑。

所述步驟(2)中聚乙烯醇溶液的濃度為5～10％，三氯化鐵與聚乙烯醇溶液的比例為100～500mg:10ml。

所述步驟(3)中金納米棒溶液與聚合物溶液的體積比為1:5～10。

所述步驟(4)中吡咯單體與金納米棒溶液的體積比為0.025～0.1:1。

所述步驟(4)中低溫環境的溫度為1～5℃。

所述步驟(5)中金納米棒/聚吡咯納米粒子的懸浮液體積為1～5mL，去離子水和乙醇體積比5～8:1，懸浮液稀釋后的總體積為5～30mL；兩次加入的氨水溶液與懸浮液的體積比分別為0.2～2:5～30。

所述步驟(5)中溫度升高至50～80℃。