[發(fā)明專利]一種飼料用釀酒酵母菌高密度發(fā)酵培養(yǎng)基配方及其應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410621690.2 | 申請日： | 2014-11-07 |
| 公開（公告）號： | CN104403953B | 公開（公告）日： | 2018-09-18 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 方俊;符晨星;盧向陽 | 申請（專利權(quán)）人： | 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號： | C12N1/16 | 分類號： | C12N1/16;A23K10/18;C12R1/865 |
| 代理公司： | 湖南兆弘專利事務(wù)所(普通合伙) 43008 | 代理人： | 江巨鰲 |
| 地址： | 410128 *** | 國省代碼： | 湖南;43 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 飼料 釀酒 酵母菌 高密度 發(fā)酵 培養(yǎng)基 配方 及其 應(yīng)用 | ||
本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)微生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種飼料用釀酒酵母的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基配方及其應(yīng)用。培養(yǎng)基配方為：淀粉18?22g/L、蔗糖5g/L、牛肉膏10g/L、尿素10g/L、酵母提取物5g/L。其發(fā)酵工藝條件為溫度25℃、pH值6?6.5、通氣量1.2:1的初始條件下發(fā)酵20?24小時，在OD值在600nm波長下吸收值達到1.4之后2?3小時開始以v/v計1:10進行補料。補料液的組成如下：淀粉100g/L、蔗糖25g/L、牛肉膏50g/L、尿素50g/L、酵母提取物25g/L。通過本發(fā)明的實施，釀酒酵母菌的發(fā)酵密度相對于YPED培養(yǎng)基活菌數(shù)增加7.3倍，菌體濃度達到了1.05×109 cfu/ml，菌體干重達到112 g/L。減少了蛋白胨和葡萄糖的用量，降低了生產(chǎn)成本，使之更加適合工業(yè)生產(chǎn)。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)微生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種飼料用釀酒酵母菌的高密度發(fā)酵培養(yǎng)基配方及其應(yīng)用。
背景技術(shù)
隨著畜牧業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展，動物對蛋白質(zhì)的需求量越來越大，而在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的總量是有一定限度的，生長必需的蛋白質(zhì)飼料需求量越來越大。而釀酒酵母菌體蛋白的營養(yǎng)價值很高，酵母干物質(zhì)中蛋白質(zhì)含量可高達50%，賴氨酸、精氨酸等含量較高，接近動物蛋白，色氨酸含量比大豆高7倍以上，此外釀酒酵母菌中還含有豐富的核苷酸、B族維生素、礦物質(zhì)以及其它生理活性物質(zhì)，適合用于添加作為高蛋白活性酵母飼料。隨著微生物工程和發(fā)酵工程的發(fā)展，釀酒酵母越來越被廣泛用于優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)飼料的生產(chǎn)。
同時隨著酵母菌在飼料中的廣泛應(yīng)用，在容積有限的發(fā)酵罐空間內(nèi)實現(xiàn)酵母菌的高密度發(fā)酵，是維持酵母制品生產(chǎn)規(guī)模和控制成本的關(guān)鍵，因此對酵母各方面的特征尤其是發(fā)酵特征的研究顯得十分必要。
普通的發(fā)酵方法通過優(yōu)化溶氧、pH值、溫度、培養(yǎng)基等實現(xiàn)釀酒酵母的高密度發(fā)酵，將眾多因素及其相互影響整合優(yōu)化形成一套完整的發(fā)酵工藝，這項工藝是一項程序復(fù)雜、綜合性高的工作。在基礎(chǔ)的研究工作和一些工業(yè)化生產(chǎn)中，釀酒酵母多采用酵母浸出粉胨葡萄糖（Yeast Extract Peptone Dextrose，YEPD）培養(yǎng)基，其培養(yǎng)基成分未能針對特定的釀酒酵母菌株進行優(yōu)化。因此，有必要根據(jù)釀酒酵母的碳源利用的模式，采用原料來源廣泛，價格低廉的營養(yǎng)成分，開發(fā)適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)且能有效提高活菌數(shù)的培養(yǎng)基。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種飼料用釀酒酵母
本發(fā)明用于高密度培養(yǎng)釀酒酵母的培養(yǎng)基組成為：按每升的配比，淀粉18-22g/L、蔗糖5g/L、牛肉膏10g/L、尿素10g/L、酵母提取物5g/L，其余為水。本發(fā)明培養(yǎng)基配制方法如下：
按照培養(yǎng)基組成分別稱取各組分，使用蒸餾水溶解；將配置好的培養(yǎng)基裝入發(fā)酵罐中，攪拌混勻，121℃滅菌15分鐘；
為達到培養(yǎng)基的最佳效果，使用本培養(yǎng)基發(fā)酵釀酒酵母時，發(fā)酵過程如下：
1、菌種活化，將冷凍保存的釀酒酵母菌在YEPD瓊脂平板上活化，挑取單菌接種于本培養(yǎng)基液體試管，25℃培養(yǎng)12小時后，以v/v計，將1%本酵母菌液培養(yǎng)基轉(zhuǎn)接于本培養(yǎng)基液體試管，培養(yǎng)12小時后作為種子培養(yǎng)基；
2、按照培養(yǎng)基配方配制釀酒酵母高密度發(fā)酵培養(yǎng)基4500 ml裝入發(fā)酵罐中，滅菌后將溫度降至25℃； 以v/v計，按5%的接種量將得到的種子培養(yǎng)基接種于發(fā)酵罐中；
3、 發(fā)酵條件設(shè)定為：溫度25℃，轉(zhuǎn)速300rpm，pH值6-6.5，通氣量1.2：1。在此條件下發(fā)酵20-24小時，當(dāng)pH降低時則自動加入堿性中和劑NaOH，泡沫過多時自動加入消泡劑吐溫80；
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