[發明專利]表達四種抗性蛋白的轉基因小鼠的構建方法

在審

• 申請號: 201410618785.9
• 申請日: 2014-11-06
• 公開（公告）號: CN104404081A
• 公開（公告）日: 2015-03-11
• 發明（設計）人: 張祿卿;鄭耀武;班路瑩
• 申請（專利權）人: 東北師范大學
• 主分類號: C12N15/85
• 分類號: C12N15/85;A01K67/027
• 代理公司: 長春市東師專利事務所 22202
• 代理人: 劉延軍;李榮武

1.表達四種抗性蛋白的轉基因小鼠的構建方法，其特征是：構建pInsulator4X-CAG-PHBN載體后，將pInsulator4X-CAG-PHBN載體與pInsulator4X-CAG載體分別用限制性內切酶SwaI線性化、酚氯仿抽提、乙醇沉淀之后進行HEK293細胞的轉染，最終獲得結果顯示pInsulator4X-CAG-PHBN載體在真核細胞中高表達四種抗生素，然后將pInsulator4X-CAG-PHBN載體原核注射，得到轉基因小鼠，通過基因型鑒定結果確認最終獲得同時具有四種抗性的轉基因小鼠。

2.?表達四種抗性蛋白的轉基因小鼠的構建方法，其特征是：將pInsulator4X-CAG-PHBN質粒通過核轉染的方法，轉染到胚胎干細胞中，用新霉素篩選轉染陽性克隆，再將克隆消化進行囊胚注射，移植到代孕鼠體內，17天之后發現有高嵌合體小鼠，經基因型鑒定，發現每一個基因都有整合，將嵌合體小鼠與B6小鼠合攏，發現嵌合體小鼠可以傳代，得到了C57/BL6顏色的小鼠，經基因型鑒定為4A轉基因小鼠。