[發(fā)明專利]表達四種抗性蛋白的轉(zhuǎn)基因小鼠的構(gòu)建方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410618785.9 | 申請日： | 2014-11-06 |
| 公開（公告）號： | CN104404081A | 公開（公告）日： | 2015-03-11 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 張祿卿;鄭耀武;班路瑩 | 申請（專利權(quán)）人： | 東北師范大學(xué) |
| 主分類號： | C12N15/85 | 分類號： | C12N15/85;A01K67/027 |
| 代理公司： | 長春市東師專利事務(wù)所 22202 | 代理人： | 劉延軍;李榮武 |
| 地址： | 130024 吉*** | 國省代碼： | 吉林;22 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 表達 抗性 蛋白 轉(zhuǎn)基因 小鼠 構(gòu)建 方法 | ||
1.表達四種抗性蛋白的轉(zhuǎn)基因小鼠的構(gòu)建方法，其特征是：構(gòu)建pInsulator4X-CAG-PHBN載體后，將pInsulator4X-CAG-PHBN載體與pInsulator4X-CAG載體分別用限制性內(nèi)切酶SwaI線性化、酚氯仿抽提、乙醇沉淀之后進行HEK293細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，最終獲得結(jié)果顯示pInsulator4X-CAG-PHBN載體在真核細(xì)胞中高表達四種抗生素，然后將pInsulator4X-CAG-PHBN載體原核注射，得到轉(zhuǎn)基因小鼠，通過基因型鑒定結(jié)果確認(rèn)最終獲得同時具有四種抗性的轉(zhuǎn)基因小鼠。
2.?表達四種抗性蛋白的轉(zhuǎn)基因小鼠的構(gòu)建方法，其特征是：將pInsulator4X-CAG-PHBN質(zhì)粒通過核轉(zhuǎn)染的方法，轉(zhuǎn)染到胚胎干細(xì)胞中，用新霉素篩選轉(zhuǎn)染陽性克隆，再將克隆消化進行囊胚注射，移植到代孕鼠體內(nèi)，17天之后發(fā)現(xiàn)有高嵌合體小鼠，經(jīng)基因型鑒定，發(fā)現(xiàn)每一個基因都有整合，將嵌合體小鼠與B6小鼠合攏，發(fā)現(xiàn)嵌合體小鼠可以傳代，得到了C57/BL6顏色的小鼠，經(jīng)基因型鑒定為4A轉(zhuǎn)基因小鼠。
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