[發明專利]抗麻疹與百白破四價卵黃抗體制劑的制備工藝

有效

• 申請號: 201410618386.2
• 申請日: 2014-11-06
• 公開（公告）號: CN104341499A
• 公開（公告）日: 2015-02-11
• 發明（設計）人: 孫萬邦;郭錦錦;唐艷麗;王少慧
• 申請（專利權）人: 遵義醫學院
• 主分類號: C07K16/12
• 分類號: C07K16/12;C07K16/10;C07K16/06
• 代理公司: 遵義市遵科專利事務所 52102
• 代理人: 劉學詩

1.?抗麻疹與百白破四價卵黃抗體制劑的制備工藝，其特征在于：該工藝包括如下步驟：

1）免疫接種疫苗雞的選擇：選擇健康狀態良好，17-18周齡粵禽雞；

2）免疫接種疫苗制備及劑量：麻疹疫苗與百白破疫苗1：1比例混合，每只雞免疫接種人用麻疹疫苗每次量為0.75ml；

3）免疫程序：免疫途徑為皮下注射，免疫次數為4次，免疫時間為第1次與第2次間隔為3天，第3次與第4次間隔為7天，免疫注射技巧為3點注射；

4）卵黃分離方法與技巧：用75%酒精浸泡雞蛋5-10分鐘，取出雞蛋用清水沖洗，干凈紗布將蛋殼擦干，用剪刀打開蛋殼一個小孔，讓蛋清緩慢流出，順流盡蛋清，打開蛋殼，小心將整個蛋黃移至滅菌濾紙上，來回流動，除盡蛋清，取蛋黃加入量杯，記錄卵黃量；

5）卵黃抗體水溶性組分液（WSF）制備：按卵黃量的8倍加入滅菌的雙蒸水，用0.1M?HCl調卵黃稀釋液PH為5.0-5.1，放置在4℃環境下攪拌8小時取出，在4℃環境下將卵黃稀釋液放入離心機中以10000-12000轉/分鐘，離心15分鐘,收取得卵黃抗體水溶性組分液上清液；

6）卵黃抗體分離提取方法：將卵黃抗體水溶性組分液上清液加入8%PEG6000?100ml，攪拌30分鐘，然后在4℃環境下放入離心機中以10000-12000轉/分鐘，離心15分鐘,收集沉淀，去上清液，沉淀裝入透析袋透析；

7）卵黃抗體提取物無菌處理：將直徑0.22μm過濾膜裝入濾器，高壓蒸汽滅菌后抗體提取物過濾，即為無菌抗體，將卵黃抗體置-20℃保存備用，保存期2年；

8）PEG溶液配制：用PBS(0.01mol/L?PH7.4)配制；

9）透析袋處理：將透析袋放入300ml透析處理液（2%NaHCO₃、1mmol/L?EDTA,PH?8.0）中煮沸10分鐘后，以蒸餾水徹底漂洗后再用300ml（PH?8.0）1mmol/LEDTA液中煮沸10分鐘，最后用滅菌的雙蒸水里外徹底沖洗。

2.如權利要求1所述的抗麻疹與百白破四價卵黃抗體制劑的制備工藝，其特征在于：所述步驟3）免疫注射技巧3點注射為，胸部一點，兩翼下各一點。

3.如權利要求1所述的抗麻疹與百白破四價卵黃抗體制劑的制備工藝，其特征在于：所述步驟4）打開蛋殼一個小孔后，從小孔內注入少量無菌NS洗凈蛋清。