[發明專利]一種天然皮革的DNA鑒別方法

有效

• 申請號: 201410614016.1
• 申請日: 2014-11-04
• 公開（公告）號: CN104328186A
• 公開（公告）日: 2015-02-04
• 發明（設計）人: 孫美蓉;費靜;陳青;周之平;王濤;張昌盛
• 申請（專利權）人: 上海出入境檢驗檢疫局工業品與原材料檢測技術中心;北京自然博物館
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 上海華工專利事務所(普通合伙) 31104
• 代理人: 繆利明

1.一種用于熒光定量PCR檢測豬皮革的特異性引物對和特異性探針，其特征在于，所述特異性引物對的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：1和SEQ?ID?NO：2所示，所述特異性探針的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：3所示。

2.一種采用熒光定量PCR檢測豬皮革的方法，包括以下步驟：

步驟一、以豬皮革的DNA為模板，進行PCR擴增；

步驟二、檢測擴增產物的熒光信號；

其特征在于，用于PCR擴增的反應體系中含有特異性引物對和特異性探針，所述特異性引物對的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：1和SEQ?ID?NO：2所示，所述特異性探針的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：3所示。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，所述PCR擴增的條件如下：

反應體系：2×Taqman?Universal?Master?Mix?10μl，DNA模板2μl，特異性引物終濃度為600nM，特異性探針終濃度為400nM，用水補足至20μl；

反應條件：95℃，10min；95℃，15s，60℃，45s，40個循環。

4.一種豬皮革的檢測試劑盒，含有以下試劑：

(a)用于熒光定量PCR檢測豬皮革的特異性引物對，所述特異性引物對的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：1和SEQ?ID?NO：2所示；

(b)用于熒光定量PCR檢測豬皮革的特異性探針，所述特異性探針的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：3所示。

5.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括：

(c)標準參照物。

6.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述標準參照物為豬皮革DNA，或含有豬皮革擴增目的片段的質粒DNA，或豬皮革。

7.如權利要求4～6中任一項所述的試劑盒的應用，其特征在于，用于鑒定豬皮革。