[發明專利]酶法制備(3R,5S)-6-氯-3,5-二羥基己酸叔丁酯在審
| 申請號: | 201410613335.0 | 申請日: | 2014-11-04 |
| 公開(公告)號: | CN104328148A | 公開(公告)日: | 2015-02-04 |
| 發明(設計)人: | 竺偉;陳加利;張文明;吳會 | 申請(專利權)人: | 尚科生物醫藥(上海)有限公司 |
| 主分類號: | C12P7/62 | 分類號: | C12P7/62;C12R1/19 |
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| 地址: | 201318 上海市浦*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 法制 羥基 己酸 叔丁酯 | ||
1.一種酶法制備(3R,5S)-6-氯-3,5-二羥基己酸叔丁酯的方法,其特征在于:將共表達全細胞、(S)-6-氯-5-羥基-3-氧代己酸叔丁酯、輔因子、葡萄糖和緩沖液按一定比例混合后反應得到產物。
2.如權利要求1所述的方法,其特征在于:所述共表達全細胞為含羰基還原酶(KRED)與葡萄糖脫氫酶(GDH)的基因工程菌。
3.如權利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述共表達全細胞是由能同時表達羰基還原酶(KRED)與葡萄糖脫氫酶(GDH)重組基因的大腸桿菌或酵母菌通過發酵培養得到,其中優選為大腸桿菌。
4.如權利要求1、2或3所述的方法,其特征在于:利用所述共表達全細胞直接催化反應。
5.如權利要求1所述的方法,其特征在于:所述共表達全細胞的濃度為10~300g/L、所述(S)-6-氯-5-羥基-3-氧代己酸叔丁酯的濃度為10~300g/L、所述輔因子的濃度為0.01~1.0g/L、所述葡萄糖的濃度為10~300g/L和所述緩沖液的濃度為10~100mM/L。
6.如權利要求1所述的方法,其特征在于:所述反應在pH=5~8、溫度為20~45℃下進行。
7.如權利要求1所述的方法,其特征在于:所述輔因子為NAD、NADH、NADP和NADPH的任意一種或它們的組合,其中優選為NADP。
8.如權利要求1所述的方法,其特征在于:所述緩沖液選自磷酸鹽緩沖液或三乙醇胺緩沖液,其中優選為三乙醇胺緩沖液。
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