[發(fā)明專利]一種基于LED光源的花燭組織培養(yǎng)方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410612910.5
• 申請(qǐng)日: 2014-11-05
• 公開（公告）號(hào): CN104521749A
• 公開（公告）日: 2015-04-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 崔瑾;章銳
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京七色光農(nóng)業(yè)科技有限公司
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

?本發(fā)明涉及一種基于LED光源的花燭組織培養(yǎng)方法，屬于植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

花燭又名花燭，為天南星科花燭屬多年生常綠草本植物。花燭花色艷麗，花莖挺拔，其葉型翠綠美觀，是世界著名的切花和盆栽花卉之一。花燭的繁殖方式主要有扦插、分株、人工種子和組織培養(yǎng)等。但由于分株繁殖難以擴(kuò)大生產(chǎn)，播種繁殖需經(jīng)人工授粉才能獲得種子，故組織培養(yǎng)是目前花燭種苗生產(chǎn)的主要途徑和有效方法。雖然，組織培養(yǎng)的應(yīng)用大大降低了花燭種苗生產(chǎn)成本，但在花燭的組織培養(yǎng)及快速繁殖過程中仍存在繁殖系數(shù)偏低、培養(yǎng)周期偏長(zhǎng)等突出問題。

在植物的組織培養(yǎng)過程中，光照是十分重要的環(huán)境因子。不同波長(zhǎng)的光質(zhì)對(duì)再生體系建立的影響不同。一些學(xué)者研究了光質(zhì)對(duì)草莓、菊花、番木瓜、馬鈴薯愈傷組織分化的影響，證實(shí)了光質(zhì)對(duì)組培植物的生物學(xué)效應(yīng)。本研究采用LED精確調(diào)制光譜能量分布，研究光質(zhì)對(duì)花燭愈傷組織分化、試管苗和移栽苗生長(zhǎng)的影響，得出了相關(guān)結(jié)果。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于在花燭愈傷組織不定芽分化至移栽馴化期間采用LED光源的光質(zhì)處理，以縮短花燭組織培養(yǎng)繁殖時(shí)間，獲得高質(zhì)量的花燭組培苗。

為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的：

一種基于LED光源的花燭組織培養(yǎng)方法，包括以下步驟：

（1）外植體的選擇和消毒：選擇完全展開的花燭幼嫩葉片（保留中脈），先置75%乙醇中30s，無菌水洗5次，再置于5%次氯酸鈉中滅菌15min，無菌水洗5次，用無菌吸水紙吸干水分；

（2）愈傷組織的誘導(dǎo)：取滅菌的葉片，切割成1cm²方塊，接種于愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，每個(gè)培養(yǎng)皿接種4個(gè)葉片外植體，封口膜封口，置于黑暗培養(yǎng)；

（3）愈傷組織不定芽分化：將葉片誘導(dǎo)生成的愈傷組織接種于培養(yǎng)皿中，每瓶接種愈傷組織0.3g左右。然后將接種后的培養(yǎng)皿置于LED紅/藍(lán)（1:1）光下處理；

（4）不定芽生根壯苗：將誘導(dǎo)出的不定芽接種至不定芽增殖培養(yǎng)基中置于日光燈下進(jìn)行復(fù)壯培養(yǎng)，然后將進(jìn)行過復(fù)壯培養(yǎng)的花燭接種至生根壯苗培養(yǎng)基中，每瓶4株，置于LED光源紅/藍(lán)（1:1）光下培養(yǎng)；

（5）馴化移栽：將生根的花燭苗移栽到水苔基質(zhì)中，附加營(yíng)養(yǎng)液為1/2?MS。在熒光燈培養(yǎng)箱內(nèi)預(yù)培養(yǎng)3天后，置于LED光源紅/藍(lán)（7:1）光下培養(yǎng)。

本發(fā)明提出的花燭組織培養(yǎng)技術(shù)，利用LED光源在花燭愈傷不定芽分化、生根壯苗和馴化移栽階段采用不同光質(zhì)LED光源照射，操作簡(jiǎn)單，形成的愈傷組織不定芽分化率高、移栽的花燭苗環(huán)境適應(yīng)能力強(qiáng)、成活率高。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作具體的介紹，所用方法如無特別說明均為常規(guī)方法。

一種基于LED光源的花燭組織培養(yǎng)方法：

（1）外植體的選擇和消毒：選擇完全展開的花燭幼嫩葉片（保留中脈），先置75%乙醇中30s，無菌水洗5次，再置于5%次氯酸鈉中滅菌15min，無菌水洗5次，用無菌吸水紙吸干水分；

（2）愈傷組織的誘導(dǎo)：取滅菌的葉片，切割成1?cm²方塊，接種于愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，每個(gè)培養(yǎng)皿接種4個(gè)葉片外植體，Parafilm封口，置于黑暗培養(yǎng)；

（3）愈傷組織不定芽分化：將葉片誘導(dǎo)生成的愈傷組織接種于培養(yǎng)皿中，每瓶接種愈傷組織0.3g左右，然后將接種后的培養(yǎng)皿置于熒光燈（F）、紅光（R）、藍(lán)光（B）、紅/藍(lán)（1:1）下培養(yǎng)28天，記錄愈傷組織不定芽分化率（%）=（分化出不定芽的愈傷數(shù)/接種愈傷數(shù)）×100%，結(jié)果如表1；

表1?光質(zhì)對(duì)花燭愈傷組織不定芽分化率的影響

（4）不定芽生根壯苗：將誘導(dǎo)出的不定芽接種至不定芽增殖培養(yǎng)基中置于日光燈下進(jìn)行復(fù)壯培養(yǎng)，然后將進(jìn)行過復(fù)壯培養(yǎng)的花燭接種至生根壯苗培養(yǎng)基中，每瓶4株，置于熒光燈、紅光、藍(lán)光、紅/藍(lán)（1:1）下培養(yǎng)；

表2?光質(zhì)對(duì)花燭試管苗生長(zhǎng)的影響