[發明專利]一種電化學適配體傳感器、其制備方法及其用途

有效

• 申請號: 201410611415.2
• 申請日: 2014-11-04
• 公開（公告）號: CN104391020A
• 公開（公告）日: 2015-03-04
• 發明（設計）人: 吳丹;魏琴;龐雪輝;胡麗華;范大偉
• 申請（專利權）人: 濟南大學
• 主分類號: G01N27/26
• 分類號: G01N27/26;G01N27/327
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種電化學適配體傳感器的制備方法，所述電化學適配體傳感器包括：工作電極、參比電極和對電極，所述工作電極的基底電極為玻碳電極，其表面依次修飾金摻雜的石墨烯、硫堇、捕獲探針、PdCu@MWCNTs/HRP/GO_X/腺苷適配體溶液和不同濃度的腺苷，所述參比電極為飽和甘汞電極，所述對電極為鉑絲電極，所述的捕獲探針為5’-CCCAGGTTCTCT-(CH₂)₆-NH₂-3’?(SSDNA1)，腺苷適配體為3’-SH-TGGAAGGAGGCGTTATGAGGGGGTCCAAGAGA-5’?(SSDNA2)；

其特征在于，所述制備方法包括以下步驟：

a、制備PdCu@MWCNTs/HRP/GO_X/腺苷適配體溶液；

b、制備電化學適配體傳感器工作電極；

c、制作電化學適配體傳感器工作曲線；

其中，步驟a制備PdCu@MWCNTs/HRP/GO_X/腺苷適配體溶液的具體步驟如下：

①?將質量比為1:1.6:4的PdCl₂，CuSO₄·5H₂O和L-谷氨酸混合于燒瓶中，加入40?mL乙二醇（EG），然后在不斷攪拌下逐滴加入8?wt%?KOH/EG調整溶液pH大約為11，此過程溶液由綠色變為深藍色；?

②?將純凈的多壁碳納米管加入到上述混合液中，其中，所述多壁碳納米管與CuSO₄·5H₂O的質量之比為3:2，超聲2?h，得到均勻的懸浮液；

③?將所得到的混合溶液轉移到50?mL高壓釜中，在160?℃下加熱6?h，然后冷卻至室溫，離心洗滌數次后，將固體于40?℃真空干燥8?h，即可得到PdCu@MWCNTs黑色固體粉末；

④?分別配制1?mg/mL的上述PdCu@MWCNTs、HRP和GO_X溶液；用Tris-HCl配制5μmol/L腺苷適配體(SSDNA2)，然后取等體積的SSDNA2?(5μmol/L)，PdCu@MWCNTs?(1?mg/mL)，HRP(1?mg/mL)和GO_X(1?mg/mL)混合后放在4?℃下震蕩24?h，得到PdCu@MWCNTs/HRP/GO_X/腺苷適配體溶液；

步驟b制備電化學適配體傳感器工作電極的具體步驟如下：

①?將玻碳電極表面進行拋光處理使其表面光潔；

②?配制濃度為2?mg/mL的金摻雜的石墨烯溶液，然后將所述金摻雜的石墨烯溶液滴到電極上，室溫晾干；

③?將0.5?mg/mL的硫堇溶液滴到電極表面，室溫晾干；

④?用Tris-HCl配制5μmol/L捕獲探針(SSDNA1)，然后將其滴到電極表面，將電極在4?℃放置2?h；

⑤?將孵化好的PdCu@MWCNTs/HRP/GO_X/腺苷適配體溶液修飾到電極上，在4?℃放置4?h；

⑥?再滴上一系列不同濃度的腺苷溶液，在4?℃保存晾干，即得到電化學適配體傳感器的工作電極；

步驟c制作電化學適配體傳感器工作曲線的具體步驟如下：

①?將作為參比電極的飽和甘汞電極、作為對電極的鉑絲電極和上述制備的工作電極正確連接在電化學工作站上；

②?含有濃度為1?mmol/L葡萄糖的pH?8.0的PBS緩沖溶液作為底液，通過方波伏安法(SWV)檢測工作電極的電流；根據電流響應的差值(不加腺苷溶液和加入腺苷溶液)與腺苷標準溶液濃度的關系，繪制工作曲線。

2.如權利要求1所述的電化學適配體傳感器在測定腺苷中的用途。