[發(fā)明專利]一種梯度膠及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410609912.9
• 申請日: 2014-11-03
• 公開（公告）號: CN104359964A
• 公開（公告）日: 2015-02-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄭華安
• 申請（專利權(quán)）人: 寧波市鄞州華謙電子有限公司
• 主分類號: G01N27/447
• 分類號: G01N27/447
• 代理公司: 寧波市鄞州盛飛專利代理事務(wù)所(普通合伙) 33243
• 代理人: 張向飛

1.一種梯度膠，其特征在于，所述梯度膠為SDS-PAGE梯度膠，所述SDS-PAGE梯度膠由輕液和重液組成，所述輕液和重液均由以下成分(以體積百分比計)組成：凝膠緩沖液(3.5×)：20-35％；A液：15-70％，雙蒸水：0-60％，甘油：0-15％，AP：0.15-0.40％，TEMED：0.015-0.04％，且所述輕液和重液組成成分及含量不同。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種梯度膠，其特征在于，所述凝膠緩沖液是通過將262g?Bis-Tris溶于去礦物質(zhì)水配制成1L的標準液，pH為6.2-6.6。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種梯度膠，其特征在于，所述A液為30％的Acr-Bis水溶液，其中Acr與Bis的質(zhì)量比為19:1。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的一種梯度膠，其特征在于，所述梯度膠為4％-20％SDS-PAGE梯度膠。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種梯度膠，其特征在于，所述4％-20％SDS-PAGE梯度膠的輕液由以下成分組成：凝膠緩沖液(3.5×)：23mL；A液：14mL，雙蒸水：43mL，AP：300μL，TEMED：30μL；重液由以下成分組成：凝膠緩沖液(3.5×)：20mL；A液：46mL，甘油：4mL，AP：200μL，TEMED：20μL。

6.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的一種梯度膠，其特征在于，所述梯度膠為8％-16％SDS-PAGE梯度膠。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種梯度膠，其特征在于，所述8％-16％SDS-PAGE梯度膠的輕液由以下成分組成：凝膠緩沖液(3.5×)：20mL；A液：15mL，雙蒸水：39mL，AP：135μL，TEMED：13μL；重液由以下成分組成：凝膠緩沖液(3.5×)：20mL；A液：30mL，雙蒸水：7.5mL，甘油：7.5mL，AP：135μL，TEMED：13μL。

8.一種梯度膠的制備方法，其特征在于，所述制備方法主要包括膠液配制、灌膠、清洗、聚合、拆膠、修整和封裝；

其中，所述膠液配制是按上述配方配制梯度膠的輕液和重液，其中，TEMED和AP在灌膠前加入，且添加順序依次為TEMED、AP；

所述灌膠的具體過程為：將配制好的梯度膠的輕液、重液置于梯度混合儀相應(yīng)容器內(nèi)，同時打開磁力攪拌器進行攪拌，然后排除灌膠管內(nèi)氣體后當重液和輕液的高度一致時，打開梯度混合儀中間的閥門進行灌膠，液體達到頂部后關(guān)閉。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種梯度膠的制備方法，其特征在于，所述封裝是將修整后的梯度膠進行真空封裝后置于4-8℃進行保存，且封裝時加入300-500μL儲存緩沖液。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的一種梯度膠的制備方法，其特征在于，所述儲存緩沖液由以下成分(以體積百分比計)組成：凝膠緩沖液(3.5×)：20-35％；甘油：1-8％，100mmol/L的EDTA：0.1-5％，余量為去礦物質(zhì)水。