[發明專利]莫能菌素預混劑的制備方法

有效

• 申請號: 201410608474.4
• 申請日: 2014-11-03
• 公開（公告）號: CN104313079A
• 公開（公告）日: 2015-01-28
• 發明（設計）人: 謝昌賢;鄧維康;劉運添;王鵬飛
• 申請（專利權）人: 金河生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12P17/16
• 分類號: C12P17/16;C12R1/465
• 代理公司: 北京同恒源知識產權代理有限公司 11275
• 代理人: 趙榮之

1.莫能菌素預混劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

a.種子培養

將經過菌種制備得到的肉桂地鏈霉菌依次進行種子搖瓶培養和種子罐培養；所述種子搖瓶培養的培養條件為以220～260rpm的轉速，在32±0.5℃條件下培養24～27h；所述種子罐培養的接種量為0.0035％種子液；所述種子罐培養的培養條件為在溫度為32±0.5℃，罐壓為0.02～0.05MPa條件下培養20～24h；

所述種子搖瓶培養所需的培養基按質量百分濃度計由以下成分組成：黃豆餅粉1～1.5％，酵母粉0.1～0.3％，葡萄糖0.2～0.5％，糊精1.0～2.0％，碳酸鈣0.05～0.1％，余量為水；培養基滅菌后pH值為6.9～7.1；

所述種子罐培養的培養基按質量百分濃度計由以下成分組成：黃豆餅粉1.0～1.5％，酵母粉0.1～0.25％，葡萄糖1.5～2.5％，碳酸鈣0.1～0.25％，消泡劑0.05～0.1％，余量為水；培養基滅菌后pH值為6.6～7.1；

b.發酵培養

將步驟a培養過后的含菌種的培養液轉入發酵罐內進行發酵培養，發酵培養條件為：罐內溫度34±1℃，溶氧量30％以上，罐壓0.03～0.05MPa；發酵過程中通過添加氨水溶液、植物油和無菌水，以使發酵液pH值維持在6.5～6.6之間，植物油按質量百分濃度計不低于3％，溶氧量不低于30％，發酵過程結束前24～48小時停止加植物油；當發酵液pH值達6.6～7.0，殘油量為0.7％以下，生物量在40％以上，莫能菌素效價不低于40000U/mL時，發酵結束；

發酵培養基按質量百分濃度計由以下成分組成：葡萄糖2.0～3.8％，黃豆餅粉1.8～3.7％，植物油1.9～2.5％，油酸甲酯0.05～1.0％，碳酸鈣0.15～0.35％，硫酸鈉0.15～0.22％，硝酸鈉0.15～0.22％，氯化錳0.01～0.03％，硫酸亞鐵0.005～0.01％，抗壞血酸0.001～0.002％，硫酸鋁0.05～0.07％，磷酸氫二鉀0.005～0.01％，消泡劑0.01～0.02％，余量為水；

c.提取

發酵結束后，先將發酵液pH值調至10～11，然后再加熱至63℃并保溫3小時，分別加入無水硅酸鈉和碳酸鈣后，將發酵液pH值調至7～8并放置30分鐘，最后噴霧干燥；所述無水硅酸鈉加入量為發酵液重量的6％，所述碳酸鈣加入量為發酵液重量的0～35％；所述噴霧干燥的條件為：進風溫度140～160℃；干燥室內溫度65～95℃，排風溫度60～70℃，干燥器內壓力-280～-380MPa。

2.根據權利要求1所述莫能菌素預混劑的制備方法，其特征在于，所述步驟a中所述種子搖瓶培養所需的培養基按質量百分濃度計由以下成分組成：黃豆餅粉1.5％，酵母粉0.2％，葡萄糖0.4％，糊精1.0％，碳酸鈣0.06％，余量為水。

3.根據權利要求1所述莫能菌素預混劑的制備方法，其特征在于，所述步驟a中所述種子罐培養的培養基按質量百分濃度計由以下成分組成：黃豆餅粉1.5％，酵母粉0.2％，葡萄糖2％，碳酸鈣0.25％，消泡劑0.1％，余量為水。

4.根據權利要求1所述莫能菌素預混劑的制備方法，其特征在于，所述步驟a中所述發酵培養基按質量百分濃度計由以下成分組成：葡萄糖3％，黃豆餅粉3％，植物油2％，油酸甲酯1.0％，碳酸鈣0.2％，硫酸鈉0.2％，硝酸鈉0.2％，氯化錳0.02％，硫酸亞鐵0.01％，抗壞血酸0.001％，硫酸鋁0.06％，磷酸氫二鉀0.01％，消泡劑0.01％，余量為水。

5.根據權利要求1所述莫能菌素預混劑的制備方法，其特征在于，所述步驟a為將經過菌種制備得到的菌種依次進行種子搖瓶培養和種子罐培養；所述種子搖瓶培養的培養條件為以220～260rpm的轉速，在32±0.5℃條件下培養25h；所述種子罐培養的接種量為0.0035％種子液；所述種子罐培養的培養條件為在溫度為32±0.5℃，罐壓為0.04MPa條件下培養24h。