[發(fā)明專利]一種液質(zhì)聯(lián)用定量檢測小鼠體內(nèi)S-構(gòu)型利伐沙班及R-構(gòu)型利伐沙班藥物濃度的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410607169.3 | 申請日: | 2014-11-03 |
| 公開(公告)號: | CN104316639A | 公開(公告)日: | 2015-01-28 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 潘仙華;閆茜;張瑞敏;于一文;徐娜;許旭;陳思羽 | 申請(專利權(quán))人: | 上海應(yīng)用技術(shù)學(xué)院 |
| 主分類號: | G01N30/88 | 分類號: | G01N30/88;G01N30/06 |
| 代理公司: | 上海申匯專利代理有限公司 31001 | 代理人: | 吳寶根;馬文峰 |
| 地址: | 200235 *** | 國省代碼: | 上海;31 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 聯(lián)用 定量 檢測 小鼠 體內(nèi) 構(gòu)型 利伐沙班 藥物 濃度 方法 | ||
1.一種液質(zhì)聯(lián)用定量檢測小鼠體內(nèi)S-構(gòu)型利伐沙班及R-構(gòu)型利伐沙班藥物濃度的方法,其特征在于具體包括如下步驟:?
(1)、樣品預(yù)處理
采用液液萃取的方法,以二氯甲烷作萃取劑,取50μL小鼠血漿樣品,加150μL二氯甲烷,渦旋震蕩10s,以10000r/min轉(zhuǎn)速,離心分離10min,用移液槍移取下層清液于1.5mL離心管中,用N2吹干,用50μL乙腈超聲溶解后進(jìn)液質(zhì)分析;
(2)、液相分析方法
所用的儀器,高效液相色譜儀為Waters公司的ACQUITY?UPLC;
液相色譜柱:CHIRALPAK?IC?250mm*4.6mm?5μm;
流動(dòng)相:按體積百分比計(jì)算,由乙腈:水:甲酸為97%:3%:0.1%的比例組成的混合溶劑,單通道等度洗脫;
流速:0.9mL/min;
柱溫:室溫;
進(jìn)樣量:20μL;
檢測波長:全波段掃描;
采用柱后分流的方法,液相流速為0.9mL/min,進(jìn)質(zhì)譜流速為0.3mL/min;
(3)、質(zhì)譜分析方法
所用的儀器,質(zhì)譜儀為Waters公司的Quattro?Premier?XE,采用高純液氮經(jīng)汽化所得的氮?dú)庾鳛榕鲎矚狻㈧F化氣、輔助氣、錐孔氣,并維持系統(tǒng)的真空狀態(tài);
質(zhì)譜過程控制參數(shù)如下:
采用ESI正離子掃描模式進(jìn)行多反應(yīng)監(jiān)測,錐孔電壓35.0V;毛細(xì)管電壓3.28kv;離子源溫度115℃;去溶劑溫度400℃;去溶劑氣流量600L/hr;錐孔氣流量50L/hr,定量離子對為436.0/144.9;
(4)、采用外標(biāo)法定量,使用峰面積計(jì)算出血漿中S-構(gòu)型利伐沙班及R-構(gòu)型利伐沙班藥物濃度。
2.如權(quán)利要求1所述的液質(zhì)聯(lián)用定量檢測小鼠體內(nèi)S-構(gòu)型利伐沙班及R-構(gòu)型利伐沙班藥物濃度的方法,其特征在于所述的血漿樣品是小鼠灌胃給藥溶液后的血漿;
所述的給藥溶液是濃度分別為1.0mg/mL利伐沙班消旋體溶液和S-構(gòu)型利伐沙班溶液;
給藥溶液配制所用的溶劑是由乙醇、分子量為400的聚乙二醇和水的體積比例為20:60:20組成的混合溶液。
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