[發(fā)明專利]一種快速提高丹參中迷迭香酸含量的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410606226.6
• 申請(qǐng)日: 2014-10-31
• 公開（公告）號(hào): CN105613285B
• 公開（公告）日: 2018-06-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 季倩;張磊
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 上海元一成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31268
• 代理人: 趙青

本發(fā)明涉及生物技術(shù)和植物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明提供了一種快速提高丹參中迷迭香酸含量的方法，是將外植體接種于MS基本培養(yǎng)基附加2,4?D、6?BA、NAA在一定條件下培養(yǎng)得到顏色有光澤呈鮮黃綠色，生長旺盛，疏松的丹參愈傷組織；將上述愈傷組織接種到于與上述所使用的MS固體培養(yǎng)基相同組分和含量的液體培養(yǎng)基中，一定條件下振蕩培養(yǎng)，反復(fù)繼代，得到分散性良好的懸浮細(xì)胞系并通過茉莉酸甲酯進(jìn)行誘導(dǎo)培育出迷迭香酸含量高的丹參細(xì)胞系，實(shí)現(xiàn)人工培養(yǎng)，達(dá)到規(guī)模化生產(chǎn)的目的。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)和植物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及到一種快速提高丹參中迷迭香酸含量的方法。

背景技術(shù)

丹參(Salvia miltiorrhiza Bunge)又名赤參、紫丹參，為唇形科鼠尾草屬多年生草本植物丹參的根。丹參中的藥用活性成分主要分為丹參酮和丹參酚酸兩大類。丹參具有活血化淤、清熱解毒、通經(jīng)、涼血消腫、鎮(zhèn)靜安神之功效，廣泛應(yīng)用于心腦血管疾病的治療。

丹參酮(tanshinone)是中藥丹參的根的提取物，其中含有丹參酮ⅡA、丹參酮Ⅰ、隱丹參酮、丹參酮ⅡB等40余種化合物。丹參酮對(duì)心血管系統(tǒng)具有廣泛的作用，主要表現(xiàn)為內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)作用、抗心肌缺血作用、改善血液代謝作用以及對(duì)心肌的保護(hù)作用。其作用機(jī)制研究證明，丹參酮對(duì)內(nèi)細(xì)胞缺血再灌注性損傷有保護(hù)作用，可以抑制低密度脂蛋白的氧化，抑制脂制代謝酶的活性，改善脂質(zhì)代謝過程，對(duì)于防治心血管疾病有良好作用(中國專利申請(qǐng)?zhí)枺?00610005271.1，公告號(hào)：CN100362993C，發(fā)明名稱：一種丹參酮乳劑及其制備方法)。

丹參酚酸類化合物是存在于丹參或其同屬植物中的酚酸類化合物，其中含有丹參酚酸A、丹參酚酸B(LAB)、迷迭香酸(RA)等多種化合物。丹參酚酸類化合物對(duì)于心腦血管具有保護(hù)作用。能夠抗纖維化，抗肝損傷。可治療消化性潰瘍。還能殺傷癌細(xì)胞，增強(qiáng)抗癌藥物的療效，且不會(huì)相應(yīng)增加抗癌藥物的毒性。丹參酚類化合物沒有明顯的毒副作用(中國專利申請(qǐng)?zhí)?200510094596.7，公告號(hào)：CN1762341B，發(fā)明名稱：治療心腦血管疾病、肝臟疾病的丹參酚酸復(fù)合物及其應(yīng)該用)。

迷迭香酸(Rosmarinicacid，簡稱RosA)是一種天然多功能酚酸類化合物。迷迭香酸具有抑菌、抗炎、抗病毒、抗腫瘤、抗過敏、抗氧化、抗血栓抗血小板聚集、防輻射和免疫抑制作用，迷迭香酸對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)有抗焦慮作用，對(duì)細(xì)胞損傷有保護(hù)作用，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、化妝品等方面。最新研究表明，丹參中迷迭香酸有抗艾滋病病毒(HIV)活性(參見文獻(xiàn)：William H，William BL.Inhibitors of human immunodeficiency virus type 1reversetranscriptase target distinct phases of early reverse transcription.Journalof virology,2001，75：3095-3104)。

隨著丹參有效成分及其藥理活性的深入研究，近年來以丹參為主要原料的藥品、制劑、化妝品和系列保健產(chǎn)品層出不窮，丹參資源供不應(yīng)求。伴隨著丹參藥材需求的日益擴(kuò)大和野生資源的逐漸減少，質(zhì)量參差不齊，加劇了丹參的供需矛盾。目前提高丹參有效成份的方法有人工栽培配合茉莉酸誘導(dǎo)，毛狀根培養(yǎng)，轉(zhuǎn)基因毛狀根培養(yǎng)，茉莉酸誘導(dǎo)毛狀根，水楊酸誘導(dǎo)丹參培養(yǎng)細(xì)胞等等；提高的成份主要是丹參酮類(包括隱丹參酮、丹參酮IIA、丹參酮I和二氫丹參酮I)和丹酚酸類(包括丹酚酸、丹酚酸B、迷迭香酸和丹酚酸K)。

因此提高丹參中有效成分的含量，尤其是迷迭香酸的含量，對(duì)培育優(yōu)異的丹參資源具有重要意義。

目前尚無文獻(xiàn)報(bào)道丹參細(xì)胞系懸浮細(xì)胞培養(yǎng)提高迷迭香酸含量的方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種快速提高丹參中迷迭香酸含量的方法，是用丹參細(xì)胞系懸浮細(xì)胞培養(yǎng)方法，提高丹參中有效成分--迷迭香酸的含量。