[發明專利]一種小極性達瑪烷型四環三萜配糖體的制備方法

有效

• 申請號: 201410604627.8
• 申請日: 2014-10-30
• 公開（公告）號: CN104447932B
• 公開（公告）日: 2017-10-31
• 發明（設計）人: 陳榮潔;曾恕芬;任楊帆;鄭立雄;陳金東
• 申請（專利權）人: 云南維和藥業股份有限公司
• 主分類號: C07J17/00
• 分類號: C07J17/00;C07J9/00
• 代理公司: 昆明正原專利商標代理有限公司53100
• 代理人: 金耀生

技術領域

本發明涉及中藥有效成分的提取、純化技術領域，具體地說是一種以人參、三七、西洋參等為原料制備小極性達瑪烷型四環三萜配糖體的方法。

背景技術

達瑪烷型四環三萜配糖體主要存在于五加科（Araliaceae）人參屬(Panax Linn)植物中，通常稱為人參皂苷(ginsenosides)。三七[P. notoginseng (Burk.) F.H.Chen]、人參(P. ginseng C.A.Meyer)和西洋參(P. quenquefolius )是工業化生產小極性達瑪烷型四環三萜配糖體的重要天然原料。

以達瑪烷型四環三萜(damarrane tetracyclic triterpenoid)為基本骨架的植物配糖體(plant glycosides)具有提高免疫力、保護心腦血管和改善性功能等多方面的生理活性。現代藥理藥效學研究表明，許多大極性或中等極性達瑪烷型四環三萜配糖體是通過在人體內代謝形成極性更小的達瑪烷型四環三萜配糖體來發揮其生理活性的。隨著對小極性達瑪烷型配糖體研究的深入，其在醫藥衛生、保健食品和功能化妝品行業的應用也越來越廣泛。因此，開發小極性達瑪烷型四環三萜配糖體現代化生產技術，對于形成優勢產業，培育龍頭企業，促進小極性達瑪烷型四環三萜配糖體醫藥健康產業的發展和中藥現代化具有重要的意義。實現小極性達瑪烷型配糖體的產業化將會掀起醫藥健康產業新興的革命。目前，制備小極性達瑪烷型四環三萜配糖體的方法主要有化學合成及降解、物理炮制和生物發酵等。化學方法和生物手段技術要求嚴格，生產成本高、周期長且對環境會造成污染。物理炮制方法具有操作簡便、周期短、成本低、環保等優點，故本發明采用此方法來進行小極性達瑪烷型四環三萜配糖體的制備。

中藥炮制是根據中醫藥理論，按照中醫辨證施治用藥的需要和藥物自身的性質對中藥材所采取的加工處理技術，歷史上又稱炮炙、修治、修制、修事、治削等。中藥炮制是我國傳統中醫藥體系在藥物方面的特色和優勢，傳統的炮制方法有蒸制、酒制、黃精汁制等。在本發明中，我們通過蒸制，改變藥性，應用現代化的生產工藝，分離純化有效部位，得到小極性達瑪烷型四環三萜配糖體。

發明內容

本發明的目的是應用物理炮制方法，結合現代化的生產工藝，提供一種從植物原料中提取小極性達瑪烷型四環三萜配糖體的工業化制備方法，該方法設計科學合理、質量可控、易于規模化生產；且收率高、產品純度高、環境友好、節約能源、生產成本低。

為實現上述目的，本發明采用了以下技術方案：

一種小極性達瑪烷型四環三萜配糖體的制備方法，包括如下步驟：

步驟（1），蒸柜蒸制：將富含大極性或中等極性達瑪烷型四環三萜配糖體的植物原料粉碎，過10-14mm篩，用純化水潤制1-2小時后，蒸制10-12小時，取出后干燥，得到富含小極性達瑪烷型四環三萜配糖體的原料；

步驟（2），超聲波提取：將步驟（1）得到的富含小極性達瑪烷型四環三萜配糖體的原料粉碎，過20-40目篩后，用原料5-10倍量質量濃度為70-98%的乙醇超聲提取3次，每次0.5-2小時，過濾，提取液減壓濃縮至無醇味，回收乙醇，得濃縮液；

步驟（3），高分子絮凝澄清：將步驟（2）得到的濃縮液加水稀釋1.5-3倍，得到稀釋液，將稀釋液加熱至70-90℃，加入稀釋液體積1-3%的高分子絮凝劑液B組分，攪拌均勻，然后加入稀釋液體積1-3%高分子絮凝劑液A組分，攪拌均勻，再于60-90℃下控溫攪拌10-40min，放置，冷卻至室溫，離心，上清液存入儲罐，不溶物用水攪拌，過濾，濾液存入儲罐；所述的高分子絮凝劑液A組分所使用的絮凝劑包括但不僅限于101果汁澄清劑、甲殼素、ZTC天然澄清劑、明膠、鞣酸或蛋清；所述的高分子絮凝劑液B組分所使用的絮凝劑包括但不僅限于101果汁澄清劑、甲殼素、ZTC天然澄清劑、明膠、鞣酸或蛋清；但高分子絮凝劑液A組分與高分子絮凝劑液B組分所使用的絮凝劑不相同；

步驟（4），大孔吸附樹脂柱層析：在層析柱中均勻裝入大孔吸附樹脂，樹脂經預處理活化后，自頂部將步驟（3）儲罐中的液體加入層析柱中，用水洗脫至洗脫液無色無味后，用質量濃度為70-98%乙醇洗脫，每小時洗脫流量為柱體積的2-8倍，用薄層層析檢測，至洗脫液無達瑪烷型四環三萜配糖體特征斑點，即停止洗脫，將乙醇洗脫液存入儲罐；