[發(fā)明專利]一種具有可視化光動(dòng)力治療特性的卟啉光敏劑的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410602362.8
• 申請(qǐng)日: 2014-10-31
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105622620B
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-11-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃建濱;趙薔;閻云
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京大學(xué)
• 主分類號(hào): C07D487/22
• 分類號(hào): C07D487/22;A61K41/00;A61K49/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京康思博達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)11426
• 代理人: 趙紅凱,劉冬梅

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及納米材料制備領(lǐng)域，特別地，涉及一種光敏劑的制備方法，更具體地涉及一種卟啉光敏劑的制備方法，該卟啉光敏劑具有可視化動(dòng)力治療特性。

背景技術(shù)

光動(dòng)力作用是指在光的作用下，在光敏劑的參與下，使機(jī)體細(xì)胞或生物分子發(fā)生機(jī)能或者形態(tài)的變化，嚴(yán)重時(shí)可以使細(xì)胞發(fā)生損傷或壞死。由于這種作用必須有氧參加，所以又稱為光敏化-氧化作用，在化學(xué)上稱這種作用為光敏化作用，在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)上稱為光動(dòng)力作用。

利用上述這種光動(dòng)力作用治療疾病的方法，被稱為光動(dòng)力治療法(PDT)。光動(dòng)力治療法為一種能夠根治早期癌癥并減小癌癥晚期腫瘤尺寸的一種臨床方法。該方法是通過(guò)將光、光敏劑和分子氧(³O₂)相互作用為基礎(chǔ)，并且使得光敏劑暴露在適當(dāng)?shù)墓饩€下，從而產(chǎn)生具有細(xì)胞毒性的氧物種(ROS)，與此同時(shí)轉(zhuǎn)移到組織細(xì)胞，該氧物種高效選擇性的對(duì)病變細(xì)胞和組織產(chǎn)生破壞。

近年來(lái)，PDT技術(shù)也被運(yùn)用于一些非腫瘤性疾病，如尖銳濕疣、牛皮癬、鮮紅斑痣、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、眼底黃斑病變、血管成形術(shù)后再狹窄等疾病的治療。

光敏劑作為光動(dòng)力治療當(dāng)中的藥物是研究光動(dòng)力治療發(fā)展的關(guān)鍵所在。光敏劑是一類特殊的化學(xué)物質(zhì)，其基本作用為傳遞能量：它能夠吸收光子，在被激發(fā)后能夠?qū)⑽盏墓饽苎杆賯鬟f給其它分子，并使自身回到基態(tài)。

在1993～1997年間，第一個(gè)商業(yè)化的光敏劑是Porfimer Sodium，其成功在美國(guó)、加拿大、歐盟、日本及韓國(guó)陸續(xù)批準(zhǔn)上市，使得PDT領(lǐng)域的研究逐漸活躍并受到重視。近年來(lái)，隨著光動(dòng)力治療藥物的研發(fā)逐步增多及激光設(shè)備技術(shù)的提高，PDT的研究迅速發(fā)展并迎來(lái)了一個(gè)新的高峰。

目前，已批準(zhǔn)上市或正在臨床研究的新的光敏劑近十種，越來(lái)越多的光敏劑正在被研究和制備當(dāng)中，大多數(shù)光敏劑通過(guò)化學(xué)合成等方法進(jìn)行制備，除了成本高，制備過(guò)程不環(huán)保等問(wèn)題，多步反應(yīng)合成分子所導(dǎo)致的制備成本的增加也成為光敏劑市場(chǎng)化的嚴(yán)重阻礙。為了適應(yīng)市場(chǎng)化的需求，尋求一種制備方法簡(jiǎn)單，價(jià)格低廉的光敏劑具有非常大的研究意義，同時(shí)也為研究人員提出了巨大挑戰(zhàn)。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明人進(jìn)行了銳意研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：通過(guò)將水溶性卟啉分子與可溶性硝酸鹽在酸性、避光以及室溫的條件下進(jìn)行反應(yīng)，得到包含有卟啉光敏劑的反應(yīng)體系，最終所得卟啉光敏劑為一種納米聚集體，且具有細(xì)胞成像和光動(dòng)力治療特性，從而完成本發(fā)明。

本發(fā)明的目的在于提供一種具有可視化光動(dòng)力治療特性的卟啉光敏劑的制備方法，該方法包括以下步驟：

1)將水溶性卟啉和可溶性硝酸鹽加入到水中，混合均勻，其中，水溶性卟啉可由式Ⅰ所示：

其中，R為極性基團(tuán)，優(yōu)選為磺酸基芳烴基、N-烷基吡啶基及其衍生物基團(tuán)如N-烷基苯并吡啶基、氨基芳烴基、季銨基芳烴基或羧基芳烴基；

2)將步驟1)中的體系的pH調(diào)至酸性；

3)在室溫和避光條件下，將步驟2)中調(diào)節(jié)pH后的體系靜置，獲得包含有卟啉光敏劑的反應(yīng)體系。

由本發(fā)明提供的制備方法得到的卟啉光敏劑，為一種納米聚集體，該納米聚集體的尺寸為200～500nm。

由本發(fā)明提供的制備方法得到的卟啉光敏劑在光動(dòng)力治療方面中的應(yīng)用。

本發(fā)明提供的制備方法工藝簡(jiǎn)單，無(wú)需復(fù)雜的合成步驟以及后處理步驟，易于操作，成本較為低廉，因此，易于生產(chǎn)上的推廣。

另外，由本發(fā)明提供的制備方法得到的卟啉光敏劑為一種納米聚集體，且該納米聚集體的尺寸均一，具有細(xì)胞成像功能和光動(dòng)力治療特性，此外，該卟啉光敏劑對(duì)細(xì)胞基本無(wú)毒害，不影響細(xì)胞活力。

附圖說(shuō)明

圖1示出實(shí)施例1所得的卟啉光敏劑的掃描電鏡照片；

圖2示出實(shí)施例1所得的卟啉光敏劑的透射電鏡照片；

圖3示出實(shí)施例4所得的卟啉光敏劑的掃描電鏡照片；

圖4示出實(shí)施例7所得的卟啉光敏劑在細(xì)胞核上的成像照片；

圖5示出在細(xì)胞成像的試驗(yàn)例中培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞照片；

圖6示出商業(yè)細(xì)胞核染料Hoechst33258在培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞核上的成像照片；

圖7示出由圖4、圖5與圖6疊加而成的照片；

圖8示出在光動(dòng)力治療特性測(cè)試的試驗(yàn)例中的培養(yǎng)細(xì)胞在紫外光作用前的共聚焦成像照片；

圖9示出在光動(dòng)力治療特性測(cè)試的試驗(yàn)例中的培養(yǎng)細(xì)胞在紫外光作用后的共聚焦成像照片；