[發(fā)明專利]鑒定豬FRZB基因中SNP位點(diǎn)基因型的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410601935.5
• 申請(qǐng)日: 2014-10-30
• 公開（公告）號(hào): CN104404136A
• 公開（公告）日: 2015-03-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張浩;王志秀;李慶崗;商鵬;張博
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68
• 代理公司: 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

1.一種鑒定豬FRZB基因中起始密碼子上游416bp處SNP位點(diǎn)基因型的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一：以豬基因組DNA為模板利用SEQ?ID?NO:1所示的序列為正向引物、SEQ?ID?NO:2所示的序列為反向引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增獲得PCR產(chǎn)物；

步驟二：利用限制性內(nèi)切酶對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行酶切獲得酶切片段；

步驟三：對(duì)酶切片段進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳獲得電泳圖，依據(jù)電泳圖中酶切片段的長度鑒定基因型。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述限制性內(nèi)切酶為內(nèi)切酶Nde?Ⅰ。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，電泳圖顯示僅有長度為262bp的酶切片段，鑒定所述SNP位點(diǎn)的基因型為CC型。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，電泳圖顯示有長度為262bp和289bp的酶切片段，鑒定所述SNP位點(diǎn)的基因型為CT型。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，電泳圖顯示僅有長度為289bp的酶切片段，鑒定所述SNP位點(diǎn)的基因型為TT型。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任意一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，PCR擴(kuò)增的工作反應(yīng)程序?yàn)椋?4-95℃預(yù)變性3-5min；94-95℃變性20-30s，50-60℃退火20-30s，72℃延伸20-30s，30-36個(gè)循環(huán)；72℃延伸5-8min。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述瓊脂糖凝膠電泳的條件包括：利用濃度為1-1.5％的瓊脂糖凝膠，在120-130V電壓下電泳30-40min。

8.權(quán)利要求1-7中所述的方法在篩選具有高生長速度豬品系中的應(yīng)用。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述豬品系為淮豬品系。