[發明專利]基于在線SPE的快速測定尿液中軛合態β-受體激動劑的方法

有效

• 申請號: 201410589994.5
• 申請日: 2014-10-28
• 公開（公告）號: CN104330512A
• 公開（公告）日: 2015-02-04
• 發明（設計）人: 李曉敏;蘇曉鷗
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/04
• 代理公司: 北京凱特來知識產權代理有限公司 11260
• 代理人: 鄭立明;趙鎮勇

技術領域

本發明涉及一種β-受體激動劑檢測技術，尤其涉及一種基于在線SPE的快速測定尿液中軛合態β-受體激動劑的方法。

背景技術

在線SPE技術是一種新型樣品快速前處理技術。它可以通過凈化柱對樣品在線凈化處理，無需經過復雜的前處理過程即可獲得良好的凈化效果。并且，將在線SPE技術與雙三元高效液相色譜和串聯質譜(HPLC-MS/MS)結合，可以在15分鐘內實現樣品的在線凈化、富集、化合物分離和最終分析，獲得穩定可靠、重現性好的確證分析結果(法律判定標準)。該方法兼具快速檢測技術方便便捷和確證分析技術準確的優點，目前，已經被用于對尿液、人體/動物血清等生物液體以及水等介質中污染物的快速檢測。

現有技術一：

對β-受體激動劑常用的檢測方法是：樣品提取——樣品濃縮——凈化小柱活化——樣品加載——樣品洗脫——溶液置換——上機分析，通過整個流程實現樣品分析。該方法的缺點是前處理復雜，需要消耗大量的人力，同時實驗結果受到實驗人員操作的影響。

現有技術一的缺點：

實驗周期長，需要經過復雜的前處理凈化過程；結果的平行性受前處理操作的影響。

現有技術二：

一些快速檢測技術，如酶聯免疫法、膠體金試紙條法等，可實現對β-受體激動劑高通量、快速檢測。其原理是利用某些與β-受體激動劑具有特異性結合的抗體、受體、酶，借助其對目標化合物的識別能力，通過測定生物分子活化程度，從而間接確定目標化合物含量。

現有技術二的缺點：

快速分析方法是半定量方法，不能作為確證分析方法；快速分析方法靈敏度遠遠低于我們使用的儀器分析方法(即HPLC/MS/MS方法)，有時候因為其檢測限較高，不能滿足一些大規模監控工作的需要。

發明內容

本發明的目的是提供一種即快速又準確的基于在線SPE的快速測定尿液中軛合態β-受體激動劑的方法。

本發明的目的是通過以下技術方案實現的：

本發明的基于在線SPE的快速測定尿液中軛合態β-受體激動劑的方法，包括雙三元液相色譜系統，所述雙三元液相色譜系統包括凈化柱、分析柱、左泵、右泵、第一管路接口、第二管路接口、第三管路接口、第四管路接口、第五管路接口、第六管路接口，相鄰的管路接口之間設有切換閥門；

首先，在樣品經過酶解預處理后，通過所述雙三元液相色譜系統對所述凈化柱正向加載樣品、對所述分析柱進行沖洗，該過程中，所述右泵依次通過第二管路接口、第一管路接口、凈化柱、第四管路接口、第三管路接口與廢液池連接，所述左泵依次通過第五管路接口、第六管路接口與分析柱連接；

然后，通過所述雙三元液相色譜系統對所述凈化柱反沖洗脫目標化合物、對所述分析柱進樣，該過程中，所述右泵依次通過第二管路接口、第三管路接口與廢液池連接，所述右泵依次通過第五管路接口、第四管路接口、凈化柱、第一管路接口、第六管路接口與分析柱連接。

由上述本發明提供的技術方案可以看出，本發明實施例提供的基于在線SPE的快速測定尿液中軛合態β-受體激動劑的方法，可實現樣品的在線凈化，無需再經過復雜的人工前處理過程；解決了傳統儀器分析方法前處理過程耗時耗力的問題，將原來需要1天左右的分析時間減少到在15分鐘內即可獲得分析結果；解決了β-受體激動劑的快速檢測方法無法準確定性定量的問題，該方法得到的結果可以作為確證方法使用；無需人工處理，因此重現性良好，避免了人工操作帶來的實驗誤差。

附圖說明

圖1為本發明實施例中凈化柱正向加載樣品、分析柱進行沖洗的狀態示意圖；

圖2為本發明實施例中凈化柱反沖洗脫目標化合物、分析柱進樣的狀態示意圖。

圖中：1至6分別指示六個管路接口。

具體實施方式

下面將對本發明實施例作進一步地詳細描述。

本發明的基于在線SPE的快速測定尿液中軛合態β-受體激動劑的方法，其較佳的具體實施方式是：

包括雙三元液相色譜系統，所述雙三元液相色譜系統包括凈化柱、分析柱、左泵、右泵、第一管路接口、第二管路接口、第三管路接口、第四管路接口、第五管路接口、第六管路接口，相鄰的管路接口之間設有切換閥門；

首先，在樣品經過酶解預處理后，通過所述雙三元液相色譜系統對所述凈化柱正向加載樣品、對所述分析柱進行沖洗，該過程中，所述右泵依次通過第二管路接口、第一管路接口、凈化柱、第四管路接口、第三管路接口與廢液池連接，所述左泵依次通過第五管路接口、第六管路接口與分析柱連接；