[發明專利]基于在線SPE的快速測定尿液中軛合態β-受體激動劑的方法

有效

• 申請號: 201410589994.5
• 申請日: 2014-10-28
• 公開（公告）號: CN104330512A
• 公開（公告）日: 2015-02-04
• 發明（設計）人: 李曉敏;蘇曉鷗
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/04
• 代理公司: 北京凱特來知識產權代理有限公司 11260
• 代理人: 鄭立明;趙鎮勇

1.一種基于在線SPE的快速測定尿液中軛合態β-受體激動劑的方法，其特征在于，包括雙三元液相色譜系統，所述雙三元液相色譜系統包括凈化柱、分析柱、左泵、右泵、第一管路接口、第二管路接口、第三管路接口、第四管路接口、第五管路接口、第六管路接口，相鄰的管路接口之間設有切換閥門；

首先，在樣品經過酶解預處理后，通過所述雙三元液相色譜系統對所述凈化柱正向加載樣品、對所述分析柱進行沖洗，該過程中，所述右泵依次通過第二管路接口、第一管路接口、凈化柱、第四管路接口、第三管路接口與廢液池連接，所述左泵依次通過第五管路接口、第六管路接口與分析柱連接；

然后，通過所述雙三元液相色譜系統對所述凈化柱反沖洗脫目標化合物、對所述分析柱進樣，該過程中，所述右泵依次通過第二管路接口、第三管路接口與廢液池連接，所述右泵依次通過第五管路接口、第四管路接口、凈化柱、第一管路接口、第六管路接口與分析柱連接。

2.根據權利要求1所述的基于在線SPE的快速測定尿液中軛合態β-受體激動劑的方法，其特征在于，所述凈化柱采用美國的Turboflow?C18-P柱，所述分析柱采用美國的Eclipse?XDB-C18柱。

3.根據權利要求2所述的基于在線SPE的快速測定尿液中軛合態β-受體激動劑的方法，其特征在于，采用以下方法配置標準溶液系列：

準確稱取沙丁胺醇、萊克多巴胺、克倫特羅標準品，分別用甲醇溶解配置成1000μg/mL單標儲備液；

用甲醇稀釋儲備液，混合配制成10μg/mL混合標準工作液；

將所述單標儲備液和混合標準工作液用0.1％甲酸水逐級稀釋，配制成0.1-100ng/mL包括0.1、0.5、1,5、10、50、100ng/mL的7點標準系列；

標準曲線每日進行分析，每隔10次進樣，重復測定10ng/mL標準溶液。

4.根據權利要求3所述的基于在線SPE的快速測定尿液中軛合態β-受體激動劑的方法，其特征在于，采用以下方法配置溶劑：

0.1％甲酸水：取1mL甲酸，與999mL純水混合均勻后制成；

10mmol?pH＝8的醋酸銨溶液：取0.77g醋酸銨，與990mL純水混合，加冰醋酸調解pH到8，再加水稀釋至1000mL后混勻；

2mol?pH＝5.2的醋酸銨溶液：取7.7g醋酸銨，與40mL純水混合，加冰醋酸調解pH到5.2，再加水稀釋至50mL后混勻。

5.根據權利要求4所述的基于在線SPE的快速測定尿液中軛合態β-受體激動劑的方法，其特征在于，采用以下方法進行樣品前處理：

酶解樣品前處理方法：取1mL尿液樣品，加入1.95mL?2M?pH＝5.2的醋酸銨溶液，加入50μLβ-葡萄糖醛苷酶或芳基硫酸酯酶，在37℃±0.3℃下酶解16小時后，過0.45μm濾膜轉移至進樣小瓶中待測。