[發明專利]一種有機酸高產菌株的高通量篩選方法有效
| 申請號： | 201410583352.4 | 申請日： | 2014-10-27 |
| 公開（公告）號： | CN104357539B | 公開（公告）日： | 2018-02-23 |
| 發明（設計）人： | 周景文;陳堅;曾偉主;李江華;堵國成 | 申請（專利權）人： | 江南大學 |
| 主分類號： | C12Q1/04 | 分類號： | C12Q1/04;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京愛普納杰專利代理事務所(特殊普通合伙)11419 | 代理人： | 張勇 |
| 地址： | 214122 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 有機酸 高產 菌株 通量 篩選 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種有機酸高產菌株的高通量篩選方法，是先將待篩選菌株于含有變色范圍包含了pH2.6～5.2中的任一pH值的pH指示劑的培養基中進行初篩，選取變色圈較大的菌株于高通量孔板中發酵后，再加入變色范圍包含了pH 1.4～3.2的任一pH值的pH指示劑進行復篩，選取變色較大的菌株進行發酵驗證；
所述方法是先用含有溴甲酚綠或百里酚藍或剛果紅的培養基對待篩選菌株進行初篩，挑選變色圈較大的菌落，于高通量孔板中發酵后，取發酵液上清，加入喹哪啶紅指示劑進行復篩，選取變色較大的菌株進行發酵驗證；
其中，加入喹哪啶紅pH指示劑的量為上清體積的1/50；上清中α-酮戊二酸的量為0.6g/L-4.8g/L；
所述有機酸是α-酮戊二酸，所述菌株為解脂亞洛酵母。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述加入喹哪啶紅指示劑后，反應5到60min。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述菌株是分離自自然界的初篩產物或人工誘變后菌株或者代謝改造后的菌株。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述復篩是加入喹哪啶紅pH指示劑后，反應30min，測定OD520，數值相對較小的即為復篩得到的菌株。
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