[發(fā)明專利]一種核基質(zhì)蛋白22化學(xué)發(fā)光免疫檢檢測劑盒及其制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410573982.3
• 申請日: 2014-10-24
• 公開（公告）號: CN104267197A
• 公開（公告）日: 2015-01-07
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張華;廖鐘財
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江東方基因生物制品有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/574;G01N33/535
• 代理公司: 湖州金衛(wèi)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 33232
• 代理人: 裴金華

1.一種核基質(zhì)蛋白22化學(xué)發(fā)光免疫檢檢測劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括：1）NMP22校準品；2）NMP22單克隆抗體預(yù)包被的固相載體；3）NMP22單克隆抗體的酶標(biāo)記物；4）與所述酶作用的發(fā)光底物液；5）濃縮洗液。

2.如權(quán)利要求1所述的核基質(zhì)蛋白22化學(xué)發(fā)光免疫檢檢測劑盒，其特征在于，所述的固相載體為微孔板、塑料珠、塑料管或磁性顆粒。

3.如權(quán)利要求1所述的核基質(zhì)蛋白22化學(xué)發(fā)光免疫檢檢測劑盒，其特征在于，所述的酶為堿性磷酸酶或辣根過氧化物酶。

4.如權(quán)利要求1所述的核基質(zhì)蛋白22化學(xué)發(fā)光免疫檢檢測劑盒，其特征在于，所述的發(fā)光底物液的發(fā)光底物為1，2-二氧乙烷類衍生物、魯米諾或異魯米諾。

5.如權(quán)利要求4所述的核基質(zhì)蛋白22化學(xué)發(fā)光免疫檢檢測劑盒，其特征在于，所述的1，2-二氧乙烷類衍生物為（金剛烷）-1，2-二氧乙烷、3-（2′-螺旋金剛烷）-4-甲氧基-4-（3〞-磷酰氧基）苯基-1，2-二氧乙烷、CSPD或CDP-Star。

6.如權(quán)利要求1所述的核基質(zhì)蛋白22化學(xué)發(fā)光免疫檢檢測劑盒，其特征在于，所述的濃縮洗液為Tris-HCl或PBST洗滌液。

7.如權(quán)利要求1所述的核基質(zhì)蛋白22化學(xué)發(fā)光免疫檢檢測劑盒的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

配制核基質(zhì)蛋白22的校準品；

以酶標(biāo)記核基質(zhì)蛋白22單克隆抗體；

以核基質(zhì)蛋白22單克隆抗體包被固相載體；

配制上述酶所作用的發(fā)光底物液；

配制濃縮洗液；

分裝所述核基質(zhì)蛋白22的校準品、酶標(biāo)記的核基質(zhì)蛋白22單克隆抗體、酶作用的發(fā)光底物液和濃縮洗液，并將各組分裝成成品。

8.如權(quán)利要求7所述的核基質(zhì)蛋白22化學(xué)發(fā)光免疫檢檢測劑盒的制備方法，其特征在于，所述發(fā)光底物液包含Tris、NaCl、KCl、HCl、3-（2′-螺旋金剛烷）-4-甲氧基-4-（3〞-磷酰氧基）苯基-1，2-二氧乙烷、Proclin?300和雙蒸水。

9.如權(quán)利要求7所述的核基質(zhì)蛋白22化學(xué)發(fā)光免疫檢檢測劑盒的制備方法，其特征在于，所述包被固相載體的步驟3）包括以下步驟：

1）包被

采用檸檬酸緩沖液與核基質(zhì)蛋白22（NMP22）單克隆抗體混合配制成包被液，并將所得包被液負載于固相載體上；

2）用生理鹽水洗滌步驟1）所得載體；

3）封閉

配制封閉液，?pH值為7-7.5，然后將所得的封閉液負載于步驟2）洗滌后的載體上。

10.如權(quán)利要求9所述的核基質(zhì)蛋白22化學(xué)發(fā)光免疫檢檢測劑盒的制備方法，其特征在于：所述封閉液為PBS緩沖液。