[發明專利]一種利用巴浪魚罐頭加工蒸煮液制備抗氧化肽的方法

在審

• 申請號: 201410570436.4
• 申請日: 2014-10-24
• 公開（公告）號: CN104313097A
• 公開（公告）日: 2015-01-28
• 發明（設計）人: 林娟;郭耀湘;朱凡;葉秀云
• 申請（專利權）人: 福州大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

技術領域

本發明公開的是一種利用巴浪魚罐頭加工蒸煮液制備抗氧化活性肽的方法，涉及食品加工技術領域，以巴浪魚罐頭加工蒸煮液為原料，利用堿性蛋白酶酶解方法制備抗氧化活性肽產品。?

背景技術

隨著我國水產品總體產量的不斷提高，產生大量的水產品加工下腳料，據統計每年我國魚類加工中有近百萬噸蒸煮液亟待開發。目前因為企業缺乏有效的技術手段，對富含蛋白質的水產品加工蒸煮液利用很少，多數采用直接排放，這不僅造成資源的浪費，同時也對海洋和陸地環境造成污染。因此對水產品加工廢棄液進行綜合開發利用，變廢為寶，生產出各種農業、醫藥、食品等行業所需的新產品，將大大降低主導產品的成本，產生較高的經濟、生態和社會效益。?

魚罐頭加工廢棄液中蛋白的回收和加工能給企業帶來很高的直接經濟收益。研究表明，金槍魚蒸煮液中蛋白含量達4%，每年臺灣省光金槍魚罐頭加工所產生的蒸煮液中就至少含有400噸優質蛋白。魚類加工蒸煮液中的蛋白是生物活性肽的優質來源，水產蛋白源生物活性肽具有多種生理功能。因此回收蒸煮液蛋白，酶解蛋白制備生物活性肽，有助于魚類加工企業實現廢棄液的環保化、高值化開發，延長魚類加工企業產業鏈，提升企業的競爭力，促進產業升級，為低碳經濟發展作貢獻。?

發明內容

本發明以巴浪魚罐頭加工蒸煮液為原料，提供一種利用堿性蛋白酶水解制備抗氧化活性肽的方法，有效提高魚罐頭加工廢棄液的附加值，實現魚罐頭加工廢棄液的高值化利用。?

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案：?

本發明提供的利用堿性蛋白酶酶解巴浪魚罐頭加工蒸煮液制備抗氧化活性肽的方法為：以巴浪魚罐頭加工蒸煮液為原料，采用10KDa中空纖維膜進行超濾濃縮，蛋白濃縮倍數為2.403倍；利用堿性蛋白酶酶解方法，以羥自由基清除率為指標，采用工藝條件為：巴浪魚蛋白加酶量6500~7000U/g，溫度55~60℃，pH8.0~9.0，酶解時間3~4h，制備獲得抗氧化肽；測定酶解液的羥自由基清除率為39.13%。

所述的工藝條件優化為：酶添加量6752.46U/g?，溫度為58.59℃，pH8.45，酶解時間為3h。?

本發明的優點在于：生物活性肽由于其安全性、易吸收、成本低等特點，具有很好的市場前景。本發明以巴浪魚罐頭加工蒸煮液作為原料，提供了一種利用堿性蛋白酶水解巴浪魚蒸煮液蛋白的工藝方法；以酶解液的羥自由基清除率作為指標可以更準確地確定制備抗氧化活性肽過程中所需要的工藝條件；并且成本低，環保，操作簡單，實現了巴浪魚罐頭蒸煮廢液的高值化利用。?

附圖說明

圖1??酶解時間的確定曲線圖。?

圖2??加酶量的確定曲線圖。?

圖3??酶解pH的確定曲線圖。?

圖4??酶解溫度的確定曲線圖。?

具體實施方式

本發明以福州百洋海味食品有限公司提供的巴浪魚罐頭加工蒸煮液為原料；堿性蛋白酶（121847U/g）購自南寧龐博生物工程有限公司。?

實施例1?

1、巴浪魚罐頭加工蒸煮液的預處理

采用10KDa中空纖維膜進行超濾濃縮，蛋白濃縮倍數為2.403倍。

、堿性蛋白酶酶解工藝條件的建立：以羥自由基清除率為指標

（1）酶解時間的確定

在加酶量5000U/g，溫度50℃，pH9.0下反應，最佳酶解時間為3h.

（2）加酶量的確定

在溫度50℃，pH9.0下反應3h，最佳加酶量為7000U/g（蛋白）.

（3）pH值的確定

在加酶量7000U/g，溫度50℃下反應3h，最佳酶解pH為8.5.

（4）溫度的確定

在加酶量7000U/g，pH?8.5下反應3h，最佳酶解溫度為60℃.

（5）在單因素實驗基礎上，設計3水平3因素響應面實驗，確定最優工藝。

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因素水平表（反應3h）

結果分析為：模型顯著；

影響因素：酶添加量＞溫度＞pH；

優化結果：58.59℃，pH8.45，酶添加量6752.46U/g，反應3h條件為最優工藝，羥自由基清除率預測值為：39.5961%；

羥自由基清除率實際測定值：39.13%，說明模型可以較好的反應實際酶解反應過程。

實施例2?