[發明專利]一種貝母藥材的鑒別與含量測定方法

有效

• 申請號: 201410566790.X
• 申請日: 2014-10-22
• 公開（公告）號: CN104407064A
• 公開（公告）日: 2015-03-11
• 發明（設計）人: 何厚洪;葉劍鋒;閔會;陳玲芳;方玲;吳華鈴;陳琳;喬洪翔;胡江寧
• 申請（專利權）人: 浙江康恩貝制藥股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 浙江杭州金通專利事務所有限公司 33100
• 代理人: 肖承云

技術領域

本發明涉及中藥材的品質鑒定技術領域，具體涉及一種貝母藥材的鑒別及其含量測定的方法。

背景技術

浙貝母為百合科貝母屬，浙貝母的干燥鱗莖，被列為著名的“浙八味”名貴中藥材之一，其味苦、性寒，具有清熱潤肺、化痰止咳、散結消腫之功效。川貝母為百合科貝母屬，川貝母的干燥鱗莖，具有清熱潤肺、化痰止咳之功效，用于肺熱燥咳、干咳少痰、陰虛勞咳、咯痰帶血等病癥的治療，也是一味治療久咳痰喘的良藥。平貝母為百合科貝母屬，平貝母的干燥鱗莖，也有清熱潤肺、止咳化痰的作用。浙貝母、川貝母和平貝母，三者同屬于貝母屬，均具有止咳化痰功效，其有效成分均為生物堿類物質；但由于其內在生物堿類的成分與含量不同，導致浙貝母、川貝母和平貝母在藥用上存在一定差別。

目前市場上的貝母品種較多，而且各品種的價格差異大；由于川貝母的自然資源稀缺、人工栽培困難，因此各貝母品種中川貝母的市場價格最高。受利益驅動，也存在一些不法商家用浙貝母、川貝母和平貝母互相代替、甚至以偽替真來混淆消費者的現象。因此需要一種合適的鑒別手段將浙貝母、川貝母和平貝母三者藥材進行區分。

目前，關于上述藥材的鑒別手段，主要包括如下幾種途徑：

途徑一是型態、顯微、理化檢測這些常規手段：由于浙貝母、川貝母和平貝母同屬不同種，這些常規的檢測手段，不易將它們區別開來。

途徑二是采用薄層色譜鑒別：該方法的缺點在于，實驗操作時人為的影響因素大，導致檢測結果的重現性差。圖14為浙貝母、川貝母和平貝母三者藥材進行薄層鑒別的預實驗結果，如圖14所示，編號1～6是第一天的實驗，其中1號和2號為川貝母，3號和4號為浙貝母，5號為貝母素甲對照，6號為貝母素甲與貝母素乙的混合對照；編號7～9是第二天的實驗，其中7號為川貝母，8號為浙貝母，9號為貝母素甲與貝母素乙的混合對照；編號10～13是第三天的實驗，其中10號為川貝母，11號為貝母素甲與貝母素乙的混合對照，12號和13號為浙貝母；編號14～17是第四天的實驗，其中14號為川貝母，15號和16號為浙貝母，17號為貝母素甲與貝母素乙的混合對照。從圖14中可以明顯看出，采用薄層鑒別法的重現性較差。

途徑三是采用高效液相色譜鑒別：高效液相色譜法具有高效、快速、穩定的特點，重現性好、靈敏度高，是一種中藥材質量有效控制的手段。然而，現有貝母類藥材的高效液相研究分為兩大類，①用于同類藥材定量的含量測定，主要針對目標成分進行提取與分析測定，這類方法的目標成分專屬性強，有時為達到目標成分的色譜峰分離，則會舍棄一些其它的特征峰。②用于同類藥材單純的色譜峰研究，主要以色譜峰的展現為目標，以相似度為評價指標，但對其色譜峰的特征性及分離度則不做要求。上述兩類高效液相研究目的都是為了構建藥材的質控標準，以進一步提高藥材質量，并不是為了對不同種的貝母藥材進行區分、鑒別。

再者，眾所周知，浙貝母、川貝母和平貝母，每種藥材由于其內在生物堿類的成分與含量不同，所以都會采用適應自身成分與含量檢測的專屬高效液相色譜法，這些方法不能套用于同屬不同種的貝母藥材的研究，更無法將不同種的貝母藥材進行良好的定量與定性區分。

綜上所述，如何建立一種鑒別浙貝母、川貝母和平貝母的方法，既能同時將三種貝母藥材的特征進行區分與判定，起到藥材真偽鑒別目的，又能對藥材成分準確定量，起到藥材質量控制目的，實現真正的一測多評，是本領域技術人員急需解決的技術難題。

發明內容

本發明提供了一種貝母藥材的鑒別及含量測定方法，其首要目的在于能夠有效區分與判定浙貝母、川貝母和平貝母藥材，次要目的在于能夠定量測定貝母藥材中貝母素甲和貝母素乙的含量，起到真偽鑒別與質量控制的雙重目的，解決了上述現有技術存在的缺陷。

本發明所采用的技術方案具體如下：

一種貝母藥材的鑒別與含量測定方法，包括如下步驟：

(1)藥材的提取與純化：取貝母藥材，研磨成粉末置于燒瓶中，加50～100％乙醇，提取1～6小時，過濾，濾液回收溶劑，溶解殘渣，上樣于中性氧化鋁柱，洗脫，收集洗脫液；

(2)供試品溶液的制備：將洗脫液蒸干后，殘渣用甲醇或乙腈溶液溶解并定容至5ml，搖勻，濾過，取續濾液，即得；

(3)對照品溶液的制備：精密稱取貝母素甲、貝母素乙的對照品適量，用甲醇溶解，即得；

(4)高效液相色譜分析：分別吸取供試品溶液和對照品溶液，注入高效液相色譜儀，按如下色譜條件測定，得貝母素甲、貝母素乙的對照品色譜圖和供試品的特征圖譜；