[發(fā)明專利]一種貝母藥材的鑒別與含量測定方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410566790.X
• 申請日: 2014-10-22
• 公開（公告）號: CN104407064A
• 公開（公告）日: 2015-03-11
• 發(fā)明（設計）人: 何厚洪;葉劍鋒;閔會;陳玲芳;方玲;吳華鈴;陳琳;喬洪翔;胡江寧
• 申請（專利權）人: 浙江康恩貝制藥股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 浙江杭州金通專利事務所有限公司 33100
• 代理人: 肖承云

1.一種貝母藥材的鑒別與含量測定方法，包括如下步驟：

(1)藥材的提取與純化：取貝母藥材，研磨成粉末置于燒瓶中，加50～100％乙醇，提取1～6小時，過濾，濾液回收溶劑得殘渣，溶解殘渣，上樣于中性氧化鋁柱，洗脫，收集洗脫液；

(2)供試品溶液的制備：將洗脫液蒸干后，殘渣用甲醇或乙腈溶液溶解并定容至5ml，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；

(3)對照品溶液的制備：精密稱取貝母素甲、貝母素乙的對照品適量，用甲醇溶解，即得；

(4)高效液相色譜分析：分別吸取供試品溶液和對照品溶液，注入高效液相色譜儀，按如下色譜條件測定，得貝母素甲、貝母素乙的對照品色譜圖和供試品的特征圖譜；

色譜條件為：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，流動相A為乙腈，流動相B為0.03％二乙胺水溶液；蒸發(fā)光散射檢測器；柱溫為30℃；進樣量為40ul；流速為1.0ml/min；采用梯度洗脫：0～15min乙腈由47％上升到52％，15～25min乙腈由52％上升到70％，25～50min乙腈由70％上升到90％，50～60min乙腈保持90％；

(5)以貝母素乙為S峰，計算各特征峰與S峰的相對保留時間RRT，并結合特征峰個數(shù)與面積，區(qū)分與判定貝母藥材的種類；其中，構建的浙貝母特征圖譜中有9個特征峰，其RRT值分別為1(峰1)、14.37(峰2)、1.52(峰3)、1.57(峰4)、0.83(峰5)、1.15(峰6)、1.23(峰7)、1.35(峰8)、1.43(峰9)，且峰5在樣品中占比最高，不含峰10、峰11；平貝母特征圖譜中有6個特征峰，其RRT值分別為1(峰1)、1.35(峰2)、1.54(峰3)、1.65(峰4)、0.77(峰5)、0.82(峰10)、1.42(峰11)，不含峰6、峰7、峰8、峰9；川貝母特征圖譜中有7個特征峰，其RRT值分別為1(峰1)、1.33(峰2)、1.52(峰3)、1.61(峰4)、1.23(峰7)、1.45(峰9)、1.41(峰11)，不含峰5、峰6、峰8、峰10；前述的峰型中，峰5為貝母素甲，峰1為貝母素乙，其余皆為未知成分；

或，根據(jù)貝母素甲、貝母素乙的對照品色譜圖，計算供試品中貝母素甲、貝母素乙的含量。

2.根據(jù)權利要求1所述的貝母藥材的鑒別與含量測定方法，其特征在于，所述的步驟(1)中，取研磨成粉末的貝母藥材適量，置于燒瓶中，加入50～300ml的70％乙醇提取2～4小時，過濾，濾液回收溶劑得殘渣，殘渣用甲醇溶液溶解，上樣于4～10g中性氧化鋁柱，再用10～100ml甲醇洗脫，收集洗脫液。

3.根據(jù)權利要求1所述的貝母藥材的鑒別與含量測定方法，其特征在于，所述的步驟(2)中，洗脫液蒸干后的殘渣用70％乙腈溶解并定容至5ml。

4.根據(jù)權利要求1～3任一項所述的貝母藥材的鑒別與含量測定方法，其特征在于，取研磨成粉末的貝母藥材2g，置于燒瓶中，加入200ml的70％乙醇溶液提取3小時，過濾，濾液回收溶劑得殘渣，殘渣用5ml甲醇溶解，上樣于6g的100～200目中性氧化鋁柱，再用50ml甲醇洗脫；洗脫液蒸干后的殘渣用70％乙腈溶解，并轉移定容至5ml量瓶中。

5.一種如權利要求1～3任一項所述的貝母藥材的鑒別與含量測定方法在構建浙貝母、川貝母或平貝母特征圖譜中的應用。