[發明專利]一種生物合成葡萄糖醛酸和葡萄糖二酸的方法有效
| 申請號: | 201410564643.9 | 申請日: | 2014-10-21 |
| 公開(公告)號: | CN104312987B | 公開(公告)日: | 2017-12-29 |
| 發明(設計)人: | 康振;陳堅;堵國成;王淼;劉葉 | 申請(專利權)人: | 江南大學 |
| 主分類號: | C12N9/02 | 分類號: | C12N9/02;C12N1/21;C12P19/02;C12P7/44;C12R1/19 |
| 代理公司: | 北京愛普納杰專利代理事務所(特殊普通合伙)11419 | 代理人: | 張勇 |
| 地址: | 214122 江*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 生物 合成 葡萄 糖醛酸 葡萄糖 方法 | ||
1.一種重組大腸桿菌,其特征在于,所述重組大腸桿菌同時表達了編碼氨基酸序列是SEQ ID NO.1所示的序列的肌醇加氧酶基因MIOX和編碼氨基酸序列是SEQ ID NO.2所示的序列的醛酸脫氫酶基因Udh;表達載體是pRSFDuet-1;宿主為E.coli BL21(DE3)。
2.一種權利要求1所述重組大腸桿菌的構建方法,是將編碼氨基酸序列為SEQ ID NO.1的肌醇加氧酶基因和編碼氨基酸序列為SEQ ID NO.2的醛酸脫氫酶基因與表達載體相連,構建重組質粒,轉化大腸桿菌宿主菌,即得到重組大腸桿菌B。
3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于,所述表達載體是pRSFDuet-1。
4.一種應用權利要求1所述的重組大腸桿菌生產葡萄糖二酸的方法,是將重組大腸桿菌種子液接種至發酵培養基中,35℃至37℃,180rpm至220rpm下,培養至OD6000.4至0.8,加入IPTG誘導,調節溫度25℃至32℃,繼續培養24h至72h。
5.根據權利要求4所述的方法,其特征在于,所述發酵培養基的碳源為肌醇。
6.權利要求1所述重組大腸桿菌在合成葡萄糖醛酸方面的應用。
7.權利要求1所述重組大腸桿菌在合成葡萄糖二酸方面的應用。
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