[發明專利]一種富鋅桑黃液體發酵產物的制備方法

有效

• 申請號: 201410562605.X
• 申請日: 2014-10-21
• 公開（公告）號: CN104372061B
• 公開（公告）日: 2018-04-06
• 發明（設計）人: 程俊文;賀亮;胡傳久;魏海龍;付立忠;李海波;鄒景泉
• 申請（專利權）人: 浙江省林業科學研究院
• 主分類號: C12P39/00
• 分類號: C12P39/00;C12P19/04;C12R1/645
• 代理公司: 浙江永鼎律師事務所33233
• 代理人: 郭小麗

技術領域

本發明涉及生物工程領域，具體涉及一種富鋅桑黃液體發酵產物的制備方法。

背景技術

桑黃(Phellinus igniarius)屬擔子菌亞門，層孔菌綱，銹革孔菌科，針層孔菌屬。桑黃菌提取物在抑制癌細胞轉移和防止癌癥手術后復發等的臨床應用中具有顯著效果，是目前國際公認的生物治癌藥劑中有效率最高的一種藥用真菌。作為目前國際公認的抗癌效果最好的大型藥用真菌，桑黃抑制腫瘤的研究主要集中在藥理活性成分桑黃多糖上。

鋅是微量元素的一種，在人體內的含量以及每天所需攝入量都很少，但對機體的性發育、性功能、生殖細胞的生成卻能起到舉足輕重的作用，故有“生命的火花”與“婚姻和諧素”之稱。人體正常含鋅量為2-3克。絕大部分組織中都有極微量的鋅分布，其中肝臟、肌肉和骨骼中含量較高。鋅是體內數十種酶的主要成分；鋅還與大腦發育和智力有關。人體的睪丸、前列腺、精液當中，都含有高濃度的鋅。當人體內鋅的含量缺乏時，性功能會因此而低下，合成睪丸素酶發生紊亂，男子將會引起陽痿和臉上生長痤瘡。鋅對激發精子活動有著特殊的作用，缺鋅會造成精子活動力的下降。長期處于缺鋅狀態而未能及時補充，可出現精子數量明顯減少、睪丸萎縮，最后導致不育。

據報道，食用菌對鋅元素的富集轉化作用較強，是鋅元素的優良載體生物。目前已有報道，多種食藥真菌對鋅具有富集作用且富鋅后其藥理活性增強。

中國專利ZL200810157380.4公開了一種富鋅蛹蟲草菌絲體的人工培養方法及其培養基，其培養基配方重量比組分為：葡萄糖1.0％-3.0％，蛋白胨0.5％-1.0％，酵母提取物0.1％-1.0％，瓊脂粉1.0％-2.0％，水余量，其pH值為5.0-7.5，其人工培養方法包括試管斜面菌種培養(活化)→試管液體菌種培養→三角瓶液體種子培養→種子罐培養→發酵罐培養→板框過濾→粉碎→真空干燥→粉碎→粉末狀菌絲體步驟。其操作簡單，培養周期短，菌絲體產率高，無污染無廢棄物，具有補鋅功能，可以進行工廠化生產。

中國專利ZL200610098121.X公開了一種富鋅亮菌多糖，由亮菌在富含鋅的液體培養基中經靜態發酵培養制備的富鋅亮菌菌索中提取得到的多糖，為無定形灰色粉末，提取率達14％，其多糖含量75％-80％，有機鋅含量105-135mg/g。實驗結果表明，本多糖無毒，能促進受輻射損傷的造血系統和免疫系統功能的恢復，具有抗輻射作用，可應用于制備抗輻射藥品或保健食品。

上述技術一般僅單一采用液態發酵方式，簡單地模仿常規食藥用菌菌絲體發酵的方式，以蛋白胨、酵母提取物為氮源，以蔗糖、葡萄糖或玉米粉為主要碳源，在培養基中添加硫酸鋅等無機鋅為主的鋅源。由于食藥用菌液體培養時間有限，無機鋅等一般不容易被菌絲體吸收，導致發酵液中的有機鋅、鋅多糖等有效組分含量不高。

目前在生物技術領域的科研與生產上，生活細胞，無論是自養細胞還是異養細胞，其人工培養的控制條件大都集中在培養基組成、溫度、通(空)氣、酸堿度、氧化還原電位、離子濃度等。利用這些傳統的控制因子研究各種生活細胞的培養技術以獲得目的次生代謝產物一直是生物技術領域的研究熱點。

然而，生活細胞生長與次生代謝的調控因子遠遠不止這些。大量的科學研究證明：生物細胞的營養生長和次生代謝產物積累都受到特定波長或頻率的電磁波等的調節，例如：一定頻率和功率的超聲波可以激活細胞并對生活細胞生長與代謝具有積極的促進作用、特殊波長的光源會有效地調節生活細胞某些特殊的代謝途徑而導致一些生物活性物質的積累、一定強度的磁場可以促進生活細胞的生長與代謝。

對生活細胞具有顯著調控效應的這些物理因子可用于提高工業化生產人類需要的生物活性物質或者藥物的效率。由于不同波長的電磁波都具備一定的能量和頻率，且只能被生活細胞內某些特殊的波敏色素或者其它波敏物質(如某些輔酶或者非酶蛋白質受體)吸收而使基因表達或相應的代謝網絡發生變化，由此引起某些特定的次生代謝產物表達量增加。或者超聲波引起的機械振動和高速傳質而促進細胞代謝和次生代謝產物的分泌。或者磁場引起生物大分子的氫鍵磁性和能量變化而導致生物大分子(酶)的活性增強。

目前國內外關于以特定低頻率磁場和低頻率超聲波為主輔助提高桑黃發酵富鋅產物產量及活性的方法還沒有相應的報道。

發明內容

本發明為了解決現有技術所存在的技術問題，提供了一種富鋅桑黃液體發酵產物的制備方法，該方法通過外源添加物以及低頻率磁場和低頻率超聲波輔助提高桑黃發酵富鋅產物產量及活性，可明顯提高有機鋅和鋅多糖含量和活性，具有安全可靠的特點。

本發明采用的技術方案是：