[發(fā)明專利]一種富鋅桑黃液體發(fā)酵產物的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410562605.X
• 申請日: 2014-10-21
• 公開（公告）號: CN104372061B
• 公開（公告）日: 2018-04-06
• 發(fā)明（設計）人: 程俊文;賀亮;胡傳久;魏海龍;付立忠;李海波;鄒景泉
• 申請（專利權）人: 浙江省林業(yè)科學研究院
• 主分類號: C12P39/00
• 分類號: C12P39/00;C12P19/04;C12R1/645
• 代理公司: 浙江永鼎律師事務所33233
• 代理人: 郭小麗

1.一種富鋅桑黃液體發(fā)酵產物的制備方法，其特征在于，包括步驟：

(1)富鋅桑黃液體種子液制備：將活化后的桑黃菌種接入液體種子培養(yǎng)基中進行桑黃液體種子培養(yǎng)，在桑黃液體種子培養(yǎng)第1天-第4天，將培養(yǎng)基置于低頻超聲環(huán)境中，超聲波頻率為10KHz-100KHz，超聲波強度控制在0.1W/cm³-0.9W/cm³，22℃-28℃恒溫，保持120r/min-150r/min振蕩培養(yǎng)1天-8天后，得到富鋅桑黃液體種子液；所述的液體種子培養(yǎng)基中含有富鋅酵母0.04％-0.4％和分心木提取物0.05％-0.4％，％為質量百分比；

(2)富鋅桑黃的液體發(fā)酵培養(yǎng)：將步驟(1)中的富鋅桑黃液體種子液按占液體發(fā)酵培養(yǎng)基體積5％-20％的用量接入液體發(fā)酵培養(yǎng)基中進行桑黃液體發(fā)酵培養(yǎng)，在桑黃液體發(fā)酵培養(yǎng)第2天-第4天，將液體發(fā)酵培養(yǎng)基置于極低頻交變磁場環(huán)境中，磁場強度0.4mT-5mT，交變磁場頻率5Hz-50Hz，22℃-28℃恒溫，保持140r/min-160r/min振蕩培養(yǎng)2天-5天后，得到富鋅桑黃發(fā)酵產物；所述的液體發(fā)酵培養(yǎng)基中含有富鋅酵母0.04％-0.4％和星油藤葉酶解物0.05％-0.4％，％為質量百分比；

所述的分心木提取物的制備方法包括：稱取一定量的分心木，粉碎，先加占分心木重量10倍量-16倍量的質量百分濃度為60％-80％的乙醇水溶液在60℃-80℃浸提1h-2h，過濾后得到上清液，上清液濃縮后真空冷凍干燥得提取物Ⅰ；上述醇提后的分心木殘渣加入占分心木重量10倍量-20倍量的水在85℃-95℃下浸提1h-2.5h，過濾后得到上清液，上清液濃縮至1/4體積后加入濃縮物體積2倍量-5倍量的無水乙醇，離心收集沉淀物，沉淀物真空冷凍干燥后得提取物Ⅱ，合并上述提取物Ⅰ和提取物Ⅱ得分心木提取物；

所述的星油藤葉酶解物的制備方法，包括：將星油藤葉加水磨成漿液，滅酶；調節(jié)漿液pH4.0-5.5，加入由纖維素酶和果膠酶構成的第一復合酶，在40℃-50℃進行酶解反應0.5小時-1.5小時，滅酶后調節(jié)漿液pH5.0-7.0，加入由木瓜蛋白酶和中性蛋白酶構成的第二復合酶，于50℃-60℃進行酶解反應1小時-1.5小時，滅酶后離心，上清液經過濾、濃縮和干燥，得到星油藤葉酶解物。

2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述的液體種子培養(yǎng)基質量百分比組成為：葡萄糖1％-2％、富鋅酵母0.04％-0.4％、分心木提取物0.05％-0.4％、KH₂PO₄0.1％-0.2％、MgSO₄ 0.05％-0.1％和余量的水。

3.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的液體發(fā)酵培養(yǎng)基質量百分比組成為：葡萄糖1％-2.5％、富鋅酵母0.04％-0.4％、星油藤葉酶解物0.05％-0.4％、KH₂PO₄0.1％-0.2％、MgSO₄ 0.05％-0.1％和余量的水。

4.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的第一復合酶與星油藤葉的質量比為1：30-50；所述的第二復合酶與星油藤葉的質量比為1：25-60。

5.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的纖維素酶與果膠酶的質量比為1:2至4:1；所述的木瓜蛋白酶與中性蛋白酶的質量比為1:3至2:1。

6.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的富鋅酵母中鋅含量為400mg/kg-1000mg/kg。