[發明專利]一種提高靈芝菌發酵物中β?葡聚糖產量的方法

有效

• 申請號: 201410562487.2
• 申請日: 2014-10-21
• 公開（公告）號: CN104357510B
• 公開（公告）日: 2017-07-28
• 發明（設計）人: 王曉玲;劉高強
• 申請（專利權）人: 中南林業科技大學
• 主分類號: C12P19/08
• 分類號: C12P19/08;C12R1/645
• 代理公司: 長沙市融智專利事務所43114
• 代理人: 袁靖

技術領域

本發明屬于真菌發酵技術領域，具體涉及一種提高靈芝β-葡聚糖產量的發酵工藝。

背景技術

靈芝(Ganodema lucidum(W.Curtis.:Fr.)P.Karst.)是最為名貴的森林大型真菌之一，在古代被稱為“仙草”。現代藥理學研究表明，靈芝具有很高的保健和藥用價值。《中華人民共和國藥典》早已正式收載靈芝為藥品；衛生部也批準靈芝為食品新資源；《美國草藥藥典與治療概要》也正式收載了靈芝。靈芝的研究已得到亞洲諸多國家，以及加拿大、美國和一些歐洲國家的重視。

靈芝的有效化學成分一直是人們關注的焦點。現已證實靈芝多糖和三萜是靈芝的關鍵藥效成分。近十余年來，國內外學者對靈芝多糖的結構和藥理作用進行了大量研究，揭示主鏈具有β-(1→3)-D、β-(1→6)-D、β-(1→4)-D結構的靈芝β-多糖，特別是靈芝β-葡聚糖具有顯著的生物活性，如具有調節免疫、抗腫瘤、抗輻射、抗氧化、抗衰老等功能，是靈芝發揮藥效的重要物質基礎之一。目前市場上僅有靈芝粗多糖(多糖提取物)或為靈芝總多糖相關產品，而靈芝β-葡聚糖及相關產品在國內外市場上很少，具有廣闊的市場開發前景。

現階段，獲取靈芝相關產品有三種途徑，一是從野生靈芝中獲取，二是人工栽培靈芝子實體，三是通過現代生物發酵技術獲得靈芝菌體和培養液(兩者合稱發酵菌物)。由于野生靈芝稀少，而傳統的人工栽培方法周期長，產量低，β-葡聚糖含量低，β-葡聚糖生產成本極高，無法滿足市場需要。而液體深層發酵技術生產靈芝具有生產周期短、產品質量和產量容易調控等特點，目前已成為獲取靈芝及其活性物質的最有效方法。近年來，靈芝的液體發酵技術取得了很大進展，但都集中在靈芝總多糖的發酵技術研究方面，而靈芝β-葡聚糖發酵技術的研究十分薄弱，靈芝β-葡聚糖的產量很低。近二十年來，真菌β-葡聚糖作為高效的生物反應調節因子(BRM)，具有重要的研究價值和廣闊的開發前景。因此，如何進一步提高靈芝中β-葡聚糖的產量，同時降低生產成本、提高經濟效益，已成為加快靈芝產品產業化進程亟待解決的問題。

已有通過發酵法生產靈芝中總多糖和靈芝酸(靈芝三萜)的技術，但缺乏液體發酵法生產靈芝β-葡聚糖的技術，如：

文獻：陳功明.靈芝多糖的液體發酵、提取純化及其硫酸化改性研究.碩士學位論文,浙江大學,2010.報道了通過液體發酵技術生產靈芝多糖，以及對產品進行提取和純化的方法，同時試驗了對多糖進行硫酸化改性的技術。但沒有針對β-葡聚糖進行液體發酵和提取純化研究。

文獻：王慧杰，李宇偉，連瑞麗，王志強，馬愛民.靈芝多糖液體發酵條件優化(食用菌學報，2007)報道了從一系列靈芝菌種中篩選出多糖產量高、生長快的靈芝菌株，研究了不同氮源、碳源及金屬離子對靈芝產多糖的影響，以及多糖液體發酵條件的優化技術，仍屬于靈芝總多糖的發酵技術，未涉及靈芝β-葡聚糖的發酵技術。

文獻：肖雷，姚菁華，呂兆啟，譚才鄧，廖延智，吳裕豪，龔燕媚，肖虹，吳曉燕，李平凡.靈芝液體發酵產胞內多糖的培養基優化(現代食品科技,2013)報道了靈芝在液體發酵過程中胞內多糖的培養基優化技術。也沒有β-葡聚糖的的發酵技術和相關提高產量的技術。

中國專利：偉張,湯亞杰，申請號200810007833，提出了一種促進靈芝酸和靈芝多糖生物合成的發酵方法。該方法分別考察了pH兩階段、溶氧兩階段控制策略或補料策略相互協同在一起后對靈芝酸和靈芝多糖生物合成的影響，提出一種促進靈芝酸和靈芝多糖生物合成的發酵方法。但研究對象仍是靈芝總多糖，未涉及靈芝β-葡聚糖。

中國專利：山東省農業科學院土壤肥料研究所，申請號2010102306901，提出了一種提高靈芝多糖產量的液體發酵方法。它利用靈芝細胞的液體培養，通過在培養基中添加稀土元素鐠、釹或鑭，提高靈芝多糖的產量，但仍是針對總多糖的技術，沒有具體針對靈芝β-葡聚糖。

地鱉蟲是鱉蠊科昆蟲地鱉(Eupolyphaga sinensis Walker)的雌蟲干燥體，是我國傳統的藥用昆蟲。我們通過大量的實驗發現，靈芝總多糖含量高時，靈芝的β-葡聚糖的量不一定最高。同時通過大量的篩選實驗，找到了一種能針對性提高靈芝β-葡聚糖產量的蟲類外源添加物質，即地鱉蟲油，并對發酵策略及液體培養基進行了優化設計，形成了一種能顯著提高靈芝發酵菌物中β-葡聚糖產量、且生產工藝簡易的β-葡聚糖生產工藝，即發酵模式為發酵一段時間后補加β-葡聚糖產物促進因子(地鱉蟲油)的全新的靈芝β-葡聚糖發酵技術。

發明內容