[發(fā)明專利]一種含有15N—L—脯氨酸殘基的三肽型減皺化合物及其制備方法和應用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410556801.6
• 申請日: 2014-10-20
• 公開（公告）號: CN104327155A
• 公開（公告）日: 2015-02-04
• 發(fā)明（設計）人: 張嘎;張賁;丁文鋒
• 申請（專利權）人: 張嘎
• 主分類號: C07K5/023
• 分類號: C07K5/023;C07K1/06;C07K1/04;A61K38/06;A61K8/64;A61P17/16;A61Q19/00
• 代理公司: 鄭州聯(lián)科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 劉建芳;楊海霞

技術領域????

本發(fā)明屬于藥用化妝品技術領域，具體涉及一種含有¹⁵N—L—脯氨酸殘基的三肽型減皺化合物及其制備方法和應用。

背景技術

皺紋的形成主要是由肌肉強烈收縮或肌肉長時間保持在強烈收縮位置所造成。

目前，治療面部皺紋的主要方法是注射肉毒桿菌毒素A，通過將肉毒桿菌毒素A注入面部肌肉的方式使面部肌肉麻痹。這樣，位于眼部或額頭的肌肉就不能再活動，從而使得眼部或額頭皺紋不易出現(xiàn)。然而，使用皮下注射肉毒桿菌毒素A的治療必須由專業(yè)醫(yī)生來實施，同時與之相關的高額費用及較高的毒性也限制了肉毒桿菌毒素A的廣泛應用。此外，其作用僅能持續(xù)3—6個月，之后就必須重復注射治療。

肉毒桿菌毒素A的作用機制在于其選擇性地阻斷乙酰膽堿在神經(jīng)肌肉突觸處的釋放，由此出現(xiàn)肌肉麻痹；這是通過一種被稱為SNAP—25蛋白質的裂解來實現(xiàn)的。

SNAP—25蛋白的N—末端氨基酸序列（Glu—Glu—Met—Gln—Arg—Arg—NH₂）能抑制在突觸中Ca⁺⁺依賴性神經(jīng)遞質的釋放，并導致肌肉松弛。由此開發(fā)的、可局部施用的化合物Ac—Glu—Glu—Met—Gln—Arg—Arg—NH₂（阿基瑞林）比肉毒桿菌毒素A的作用約弱5000倍，從而使其能更好地按劑量給藥并且?guī)缀鯚o毒性。然而，它的松弛肌肉作用太弱且極不穩(wěn)定，甚至于不能達到較滿意的減少皺紋的效果。

自然界的氮是由氮14和氮15兩種穩(wěn)定同位素組成的，其中氮14的含量約為99.63%，其原子量為14.0037，氮15的含量約為0.365%，其原子量為15.0001。由于普通的氮缺乏適用的放射性同位素示蹤原子，氮15就成為化學、醫(yī)學、農(nóng)業(yè)科學等研究應用領域中的重要示蹤原子（穩(wěn)定性同位素示蹤原子），它是一種對人體無輻射危害、損傷的安全的示蹤劑。至上世紀80年代初，國際上已有數(shù)百種氮15標記化合物用于各項研究和應用，為此還有專用的氮15光譜分析儀。醫(yī)學研究中，在對藥物作用、藥物分布、藥物代謝等情況進行了解掌握時，氮15標記化合物的應用發(fā)揮出其功能顯著的示蹤劑作用。

發(fā)明內容

本發(fā)明目的在于提供一種含有¹⁵N—L—脯氨酸殘基的三肽型減皺化合物及其制備方法和應用。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術方案：

一種含有¹⁵N—L—脯氨酸殘基的三肽型化合物和/或其與酸形成的鹽，所述三肽型化合物結構式如下：

；

其化學縮寫為H—（β-Ala）—（¹⁵N-Pro）—Dab—NH—Bzl；其中：

β-Ala指β—丙氨酸殘基；

^???15N-Pro指氮元素為氮15的L—脯氨酸殘基；

??Dab指L—2,4二氨基丁酸殘基；

??Bzl指芐基。

上述三肽型化合物可與酸形成單價或多價的、均質或混合的鹽。具體的，所述鹽可以為鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、甲酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、三氯乙酸鹽、丙酸鹽、乙醇酸鹽、琥珀酸鹽、富馬酸鹽、丙二酸鹽、馬來酸鹽、草酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、苯甲酸鹽、水楊酸鹽、扁桃酸鹽、肉桂酸鹽、煙酸鹽、甲磺酸鹽或甲苯磺酸鹽。其中優(yōu)選乙酸鹽。

所述三肽型化合物和/或其與酸形成的鹽的制備方法，其包括如下步驟：

1）將Fmoc—Dab(Boc)—OH與2-Cl-Trt樹脂連接，制得Fmoc—Dab(Boc)—2-Cl-Trt樹脂；

2）對步驟1）制得產(chǎn)物的氨端進行脫保護，脫除保護基團；

3）將步驟2）制得產(chǎn)物與Fmoc—L—（¹⁵N-Pro）—OH在縮合劑存在條件下進行縮合反應，制得Fmoc—（¹⁵N-Pro）—Dab(Boc)—2-Cl-Trt樹脂；

4）對步驟3）制得產(chǎn)物的氨端進行脫保護，脫除保護基團；

5）將步驟4）制得產(chǎn)物與Boc—(β-Ala)—OH在縮合劑存在條件下進行縮合反應，制得Boc—（β-Ala）—（¹⁵N-Pro）—Dab(Boc)—2-Cl-Trt樹脂；

6）對步驟5）制得產(chǎn)物進行切割，得到Boc—（β-Ala）—（¹⁵N-Pro）—Dab(Boc)—OH；