[發(fā)明專利]一種植物乳桿菌代謝產(chǎn)物抑制性的分析方法及應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410555716.8
• 申請日: 2014-10-17
• 公開（公告）號: CN104561227A
• 公開（公告）日: 2015-04-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳衛(wèi);張秋香;姚沛琳;王剛;田豐偉;劉小鳴;趙國忠;趙建新;張白曦;張灝
• 申請（專利權(quán)）人: 江南大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02;A61K35/747;A61P1/02;C12R1/25;C12R1/46
• 代理公司: 無錫互維知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32236
• 代理人: 王愛偉

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種選擇出來的植物乳桿菌代謝產(chǎn)物對變異鏈球菌生物膜抑制性的分析方法，該乳桿菌的代謝物及其成分可以通過抑制活性來減少口腔中變異鏈球菌的數(shù)量，用于預(yù)防或治療齲齒，屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

齲病是人類常見的細(xì)菌感染性疾病，能引起牙體硬組織進行性的破壞，造成齲齒(又稱“蟲牙”或“蛀牙”)，嚴(yán)重危害口腔健康。第60屆世界衛(wèi)生大會決議指出，必須將預(yù)防口腔疾病和促進口腔衛(wèi)生納入慢性病綜合預(yù)防和治療規(guī)劃。隨著口腔微生物物學(xué)、免疫學(xué)及生物化學(xué)研究的發(fā)展，目前比較公認(rèn)的致齲觀點是四聯(lián)因素論，其基本觀點包括：齲病是含糖類食物(尤其是蔗糖)進入人體口腔后在牙菌斑內(nèi)由于變異鏈球菌等致齲菌的作用，利用底物，發(fā)酵產(chǎn)酸，經(jīng)過一定的時間，將牙齒的無機物溶解破壞所致。在齲齒發(fā)病過程中應(yīng)具有四個必需的因素：(1)致齲菌；(2)食物(糖類或碳水化合物)；(3)宿主易感牙齒；(4)牙菌斑，并且內(nèi)在的pH在臨界pH5以下維持一定的時間。

目前的大量研究證實，血鏈球菌和變異鏈球菌是在齲病病損部位中最常分離出的菌種，而變異鏈球菌因為具有一些重要的毒力因子，被公認(rèn)為重要的致齲菌。其毒力因子涉及黏附、產(chǎn)酸、耐酸和合成胞外多糖等方面的因素，是細(xì)菌致齲的物質(zhì)基礎(chǔ)。變異鏈球菌可以介導(dǎo)細(xì)菌對牙齒表面的非蔗糖依賴性黏附，在細(xì)菌對牙齒表面的初始黏附及促進菌體之間的聚集中起重要作用。此外，它還能利用蔗糖和葡糖基轉(zhuǎn)移酶(GTFs)合成具有很強粘性的水不溶性胞外多糖(Loesche?WJ，等人，Microbiol?Rev.50：353-380，1986)。

從齲病的細(xì)菌性致齲的病因出發(fā)，目前預(yù)防和治療齲齒多從減少變異鏈球菌發(fā)揮作用的角度出發(fā)。如減少變異鏈球菌的數(shù)量，目前常用的藥劑是洗必泰漱口水等；減少糖的攝入，尤其是蔗糖等，目前常用變異鏈球菌難代謝的甜味劑，如山梨醇、木糖醇、阿斯巴甜等；去除牙菌斑，目前常用的是機械去除。

傳統(tǒng)觀點認(rèn)為乳桿菌是齲病的主要致齲菌，但現(xiàn)在研究發(fā)現(xiàn)，乳桿菌在齲病發(fā)病過程中的始動作用不明顯，不是首先誘發(fā)齲的病原菌，但在齲已形成，促齲發(fā)展中起作用，尤其在牙本質(zhì)深齲的發(fā)展中起重要作用。一旦齲病損害形?成，病損局部和唾液中的乳桿菌計數(shù)便迅速增加，所以常通過測定唾液中乳桿菌數(shù)量來預(yù)測齲病的發(fā)展趨勢，可作為流行病病學(xué)調(diào)查的“齲標(biāo)志菌”。這些乳桿菌一般分離自牙菌斑內(nèi)，具有一定的致齲性。

牙菌斑生物膜是齲病發(fā)生的始動因子，在齲病的發(fā)生中發(fā)揮著重要作用。目前還沒有乳酸菌的代謝產(chǎn)物對變異鏈球菌生物膜的抑制性的專利文件。因此，篩選一株對浮游的變異鏈球菌具有抑制作用的乳酸菌，并且證明其代謝產(chǎn)物中的有效成分在生物膜模型中具有良好的抑制作用，同時研制其代謝產(chǎn)物的有效成分的實際用途就顯得十分必要。

發(fā)明內(nèi)容

本部分的目的在于概述本發(fā)明的實施例的一些方面以及簡要介紹一些較佳實施方式。在本部分以及本申請的說明書摘要和發(fā)明名稱中可能會做些簡化或省略以避免使本部分、說明書摘要和發(fā)明名稱的目的模糊，而這種簡化或省略不能用于限制本發(fā)明的范圍。

鑒于上述和/或現(xiàn)有植物乳桿菌代謝產(chǎn)物抑制性的分析方法及植物乳桿菌FB-T9代謝產(chǎn)物在治療和預(yù)防齲齒方面的應(yīng)用中存在的問題，提出了本發(fā)明。

因此，本發(fā)明的一個目的是提供一種植物乳桿菌FB-T9代謝產(chǎn)物對變異鏈球菌生物膜抑制性的建模以建立生物膜基礎(chǔ)上的分析方法。