[發明專利]非洲豬瘟病毒VP73蛋白特異性多克隆抗體的制備方法及應用在審
| 申請號： | 201410554643.0 | 申請日： | 2014-10-17 |
| 公開（公告）號： | CN104311660A | 公開（公告）日： | 2015-01-28 |
| 發明（設計）人： | 陶虹;花群義;呂建強;曹琛福;劉建利;靳雯雯;楊俊興;張彩虹;孫潔;唐金明;廖立珊 | 申請（專利權）人： | 深圳出入境檢驗檢疫局動植物檢驗檢疫技術中心 |
| 主分類號： | C07K16/08 | 分類號： | C07K16/08;G01N33/569 |
| 代理公司： | 廣州新諾專利商標事務所有限公司 44100 | 代理人： | 劉杉 |
| 地址： | 518045 廣東省深圳市*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 非洲 豬瘟 病毒 vp73 蛋白 特異性 克隆 抗體 制備 方法 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種非洲豬瘟病毒VP73蛋白的特異性多克隆抗體的制備方法，包括如下步驟：
a)制備VP73蛋白重組抗原：將VP73基因序列擴增至原核表達載體GEX-KG中，轉化大腸桿菌BL21(DE3)感受態細胞，誘導表達獲得重組蛋白抗原；
b)動物免疫：取步驟a)獲得的重組蛋白抗原30μg與等體積的弗氏完全佐劑充分乳化制成免疫原,選擇8周齡雌性Balb/c小鼠，分別在第1、15、30天對小鼠進行第一、二、三次免疫；
c)加強免疫：取步驟a)獲得的重組蛋白抗原30μg作為免疫原，在步驟b)中第三次免疫后45天，對小鼠進行免疫；
d)對步驟c)加強免疫7天后的小鼠，腹腔注射0.5ml降植烷，7天后，接種1×105個SP2/0細胞；
e)步驟d)接種SP2/0細胞7～10天后采集腹水，腹水中含有所述非洲豬瘟病毒VP73蛋白的特異性多克隆抗體。
2.根據權利要求1所述的方法制備獲得的非洲豬瘟病毒VP73蛋白的特異性多克隆抗體。
3.權利要求2所述的非洲豬瘟病毒VP73蛋白的特異性多克隆抗體在制備非洲豬瘟病毒抗體檢測試劑中的應用。
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