[發(fā)明專利]基于絡(luò)合作用與在線掃集技術(shù)的毛細(xì)管電泳直接紫外法快速檢測Amadori化合物

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410554460.9
• 申請日: 2014-10-17
• 公開（公告）號: CN104297326A
• 公開（公告）日: 2015-01-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張連富;余佳浩
• 申請（專利權(quán)）人: 江南大學(xué)
• 主分類號: G01N27/447
• 分類號: G01N27/447
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

基于絡(luò)合作用與在線掃集技術(shù)的毛細(xì)管電泳直接紫外法快速檢測Amadori化合物。本發(fā)明涉及到對番茄制品、干制果品、煙草等食品中Amadori化合物的檢測，以進(jìn)一步指導(dǎo)食品加工。方法利用Amadori化合物與Cu²⁺形成穩(wěn)定絡(luò)合物，而該絡(luò)合物具有比Amadori化合物本身更強(qiáng)的紫外吸收、波長紅移的特性，結(jié)合Amadori化合物-Cu²⁺絡(luò)合能力以及荷質(zhì)比不同提供毛細(xì)管電泳分離的動力，利用毛細(xì)管電泳的在線掃集技術(shù)進(jìn)一步提高檢測的靈敏度和檢測限，可用于番茄制品如番茄粉、干果如葡萄干、煙草中Amadori化合物的檢測。屬于儀器分析和食品加工領(lǐng)域。

背景技術(shù)

Amadori化合物是美拉德反應(yīng)的初級產(chǎn)物。食品熱加工過程中，葡萄糖、果糖等還原糖作為羰基供體，與氨基酸、肽、蛋白質(zhì)中含有的自由氨基之間發(fā)生糖胺縮合反應(yīng)，經(jīng)Amadori重排后，形成結(jié)構(gòu)、性質(zhì)相對穩(wěn)定的中間產(chǎn)物——1-氨基-1-脫氧-2-酮糖，即Amadori化合物，其通用表達(dá)方式為Fructose?Amino?acid，包括FruGlu、FruPca、FruHis、FruPhe、FruLeu、FruIle、FruAla等。Amadori化合物的含量對生產(chǎn)中控制產(chǎn)品營養(yǎng)、色澤、風(fēng)味等產(chǎn)品質(zhì)量，改善工藝具有重要意義，尤其是在番茄制品、干果制品、煙草等的加工中。

由于Amadori化合物對番茄制品、煙草產(chǎn)品的質(zhì)量有非常大的影響，建立一種快速、高效的測定Amadori化合物的方法非常重要。但目前對Amadori化合物的檢測方法主要有利用不同檢測器(示差折光檢測器RID、紫外檢測器UV、蒸發(fā)光散射檢測器ELSD、質(zhì)譜檢測器MS)、不同固定相的高效液相色譜法；利用電化學(xué)檢測器(ECD)或者二極管陣列檢測器(PDA)、質(zhì)譜檢測器(MS)的高效離子交換色譜法(HPAEC)以及利用紫外可見檢測器(UV)、熒光檢測器(FL)和質(zhì)譜檢測器(MS)的毛細(xì)管電泳法。而這些現(xiàn)有的方法各有其缺點和局限性：高效液相色譜法需要耗時的清洗柱子的過程，并且利用常規(guī)的反相柱，不能將結(jié)構(gòu)相似的多種Amadori化合物有效的分開；高效離子交換色譜法只對一部分Amadori化合物有良好的分離檢測能力，不適用于分析復(fù)雜體系，另外部分Amadori化合物會在離子交換柱上發(fā)生分解；而毛細(xì)管電泳檢測主要是利用紫外或熒光檢測器，但由于大多數(shù)Amadori化合物有很弱的或者沒有紫外可見光吸收和熒光產(chǎn)生，因此利用紫外或熒光檢測器的毛細(xì)管電泳檢測Amadori化合物往往需要衍生化處理，衍生化過程復(fù)雜且耗時，同時利用質(zhì)譜檢測器的毛細(xì)管電泳由于設(shè)備昂貴，并沒有廣泛被使用。

研究表明，路易斯酸和路易斯堿的相互作用能提供毛細(xì)管電泳分離的動力。許多有機(jī)化合物含有大量的O和N原子，能夠提供孤對電子，從而與Cu²⁺發(fā)生相互作用，形成絡(luò)合物(J.Sep.Sci.2009，32，1927-1933；J.Anal.Chem.2006，34，1219-1222；J.Am.Chem.Soc.2000，122，3787-3788)。比如Amadori化合物就能與Cu²⁺形成絡(luò)合物(Inorganica?Chimica?Acta?214(1993)57-66；J.Agric.Food?Chem.2007，55，10373-10381；Inorganica?Chimica?Acta?413(2014)45-54)。不同Amadori化合物與Cu²⁺的不同絡(luò)合能力以及荷質(zhì)比提供分離的動力。更為重要的是Cu²⁺與Amadori化合物的絡(luò)合作用所引起的電荷轉(zhuǎn)移躍遷使得絡(luò)合物的紫外吸收波長紅移，在260nm左右有很強(qiáng)的紫外吸收，這也大大提高了檢測的靈敏度，使得定量成為可能。

毛細(xì)管電泳的在線掃集技術(shù)：樣品區(qū)的自由態(tài)的分析物A帶很少電量或者不帶電，因此其有效遷移率很小，在施加電壓后，Mⁿ⁺即Cu²⁺有很大的有效遷移率，因此能夠很快的進(jìn)入樣品區(qū)SZ，進(jìn)一步與Amadori化合物形成絡(luò)合物，并且絡(luò)合物的遷移率遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于A，從而樣品區(qū)分析物濃度能進(jìn)一步提高(J.Sep.Sci.2009，32，1927-1933)。

本發(fā)明利用Amadori化合物與Cu²⁺形成穩(wěn)定絡(luò)合物，而該絡(luò)合物具有比Amadori化合物本身更強(qiáng)的的紫外吸收、波長紅移的特性，結(jié)合毛細(xì)管電泳的在線掃集技術(shù)進(jìn)一步提高檢測的靈敏度和檢測限，可用于番茄制品、干果制品、煙草等食品中Amadori化合物的快速檢測。