[發明專利]有氧下可提升重組蛋白質表現的菌株

有效

• 申請號: 201410553469.8
• 申請日: 2014-10-17
• 公開（公告）號: CN104371964B
• 公開（公告）日: 2017-11-28
• 發明（設計）人: 趙云鵬;姜中人;何宜靜;王祉雯
• 申請（專利權）人: 逢甲大學
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12N15/09;C12R1/19
• 代理公司: 上海申新律師事務所31272
• 代理人: 吳俊

1.一種有氧下提升重組蛋白質表現的方法，其特征在于，包括：

于有氧下培養一大腸桿菌菌株于一含葡萄糖、甘油、與阿拉伯糖的培養基；

其中，該大腸桿菌菌株包括：

至少一非內源啟動子，可操作地連接至該大腸桿菌菌株的染色體上的glpF基因、gldA基因、dhaKLM基因操縱組、araE基因、galP基因、及glk基因；

一araBAD啟動子，可操作地連接至該染色體上的T7RNA聚合酶基因；以及

一T7啟動子，可操作地連接至一重組蛋白質基因；

其中，該大腸桿菌菌株缺少araABD基因操縱組、araFGH基因操縱組、及ptsG基因。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，該非內源啟動子選自于由EM7啟動子、Trc啟動子、及λ噬菌體P_R啟動子所組成的群組。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，該連接至glpF基因的非內源啟動子為Trc啟動子，該連接至gldA基因的非內源啟動子為λ噬菌體P_R啟動子，該連接至dhaKLM基因操縱組的非內源啟動子為λ噬菌體P_R啟動子，該連接至galP基因的非內源啟動子為Trc啟動子，而該連接至glk基因的非內源啟動子為λ噬菌體P_R啟動子。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，該連接至glpF基因的非內源啟動子位于該glpF基因的上游區域，該連接至gldA基因的非內源啟動子位于該gldA基因的上游區域，該連接至dhaKLM基因操縱組的非內源啟動子位于該dhaKLM基因操縱組的上游區域，該連接至galP基因的非內源啟動子位于該galP基因的上游區域，而該連接至glk基因的非內源啟動子位于該glk基因的上游區域。

5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，該重組蛋白質基因位于該大腸桿菌菌株的染色體上，或位于該大腸桿菌菌株內的一質體中。

6.如權利要求1或5所述的方法，其特征在于，該T7啟動子位于該重組蛋白質基因的上游區域。