[發明專利]葡萄發酵提取物通過美拉德反應生產煙用香料的方法

有效

• 申請號: 201410552458.8
• 申請日: 2014-10-17
• 公開（公告）號: CN104293487A
• 公開（公告）日: 2015-01-21
• 發明（設計）人: 潘曦;李冉;柯煒昌;劉華臣
• 申請（專利權）人: 湖北中煙工業有限責任公司
• 主分類號: C11B9/00
• 分類號: C11B9/00;A24B3/12
• 代理公司: 武漢開元知識產權代理有限公司 42104
• 代理人: 黃行軍;孫林

技術領域

本發明涉及煙用香料的制備方法，具體地指一種葡萄發酵提取物通過美拉德反應生產煙用香料的方法。

背景技術

天然香料不斷增長的市場需求，促進了香精香料生產技術的迅速發展。盡管傳統的化學合成和天然提取方法還在起重要的作用，但是利用生物化學技術生產香料正受到人們越來越多的重視。目前，在香精香料的生物合成中應用最廣泛的生物技術是微生物發酵工程，以天然植物及其提取物為原料，利用微生物可以生產各種天然香料。

微生物技術制備香精香料具有如下優點：生物性香料組分豐富，香氣具有獨特風格而又與煙香協調，能夠顯著提高香氣質量，使煙氣醇和、細膩、飽滿；便于構建自主知識產權，“天然”、“綠色”，類似于自然界中的生物合成過程，難以模仿；香料風格可以定向調控，可以根據不同品牌卷煙加香要求，開發出適合于某種品牌卷煙的專用香料；有助于形成卷煙產品的獨特風格，在卷煙新產品開發加香工藝中可以發揮較大作用；并且成本較為低廉、容易轉化到生產中。

美拉德反應類香料一直是煙草和食品上極為重要和極有應用價值的香料，美拉德反應物在煙用香料中應用廣泛。煙草在調制、陳化、加工和燃吸等過程中，均可能發生美拉德反應。隨著人們健康意識的提高，煙廠在解決降低卷煙焦油量、而又能保持或滿足卷煙吸食可用性方面所面臨的困難日益突出。美拉德反應作為煙草特征香氣形成的重要途徑之一，在煙草增香中的應用研究倍受青睞。反應產生的香氣根據糖源、氮源不同也不同，反應產生大量雜環香味化合物，對卷煙煙氣有改善作用。

公開號為CN101411543的中國專利申請，公開了一種制備煙用香料的方法，其將糖類物質與氨基酸進行反應，制得煙用香料。然而，該方法僅用反應的基本物質—糖類與氨基酸間的美拉德反應產物作為煙用香料，難于制備特種香型香料。

公開號為CN101637305A的中國專利申請，公開了一種利用美拉德反應制備煙用香料的方法，其將葡萄糖、復配氨基酸及特種定向增香型煙末浸膏進行反應，值得具有巧克力和烤香的煙用香料。然而，該方法原料來源復雜，成本較高，制得香料香型較單一，難于普遍應用于卷煙中。

綜上所述，利用美拉德反應制備煙用香料的方法，要么工藝復雜，成本高，原料來源不穩定，要么香氣單調，效果不理想，因此，提供一種效果好，成本低，煙用香味豐滿細膩的美拉德反應煙用香料是非常必要的。

發明內容

本發明的目的就是要克服現有技術所存在的不足，提供一種葡萄發酵提取物通過美拉德反應生產煙用香料的方法，從而形成香味豐富、獨特，品種多樣、具有濃郁果香，與卷煙煙氣協調的香料。

為實現上述目的，本發明所提供的葡萄發酵提取物通過美拉德反應生產煙用香料的方法，包括以下步驟：

1)先將葡萄洗凈，果渣滅菌后加入實驗室微生物產香菌株混合均勻，于30℃恒溫發酵3天后，分三次加入體積分數75％乙醇，每次加熱回流提取3小時，過濾，合并3次濾液，靜置，取上清液于60℃蒸餾除去乙醇，所得香料再用體積分數95％乙醇進行回溶，靜置，取上清液減壓濃縮至膏狀，制得葡萄發酵提取物；

2)在葡萄發酵提取物中加入氮源物質，所述氮源物質為脯氨酸、丙氨酸、纈氨酸、磷酸氫二胺中一種或幾種，加入溶劑，在常壓下攪拌、加熱回流使其發生美拉德反應，調節反應體系的PH值、回流溫度以及反應時間，即得煙用香料。

本發明在步驟1)中，實驗室微生物產香菌株的制備方法：將成熟的西紅柿去皮、破碎，取汁液加入無菌水中，然后接種于含氯霉素的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基平板上，于28℃恒溫培養48h；從平板中挑取單菌落，將所得到菌株單菌落在馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養液中28℃厭氧選擇富集培養48h；將試樣分別稀釋于102、104、106倍，涂布于分離純化的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基平板上，于28℃恒溫培養48h；用接種環挑取純化平板上的單菌落，在馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養液中培養富集；取富集液接種于葡萄汁培養基中，于28℃恒溫培養7d，取出后通過嗅香進行篩選，篩出一株具有特色香氣的產香菌株。

本發明在步驟2)中，加入所述氮源物質時，各原料重量份比及反應條件為：

在葡萄發酵提取物中加入脯氨酸時，葡萄發酵提取物500份，脯氨酸2～20份，溶劑10～25份，反應體系的PH值為9～11，回流溫度為80～115℃，反應時間為1～4小時；

在葡萄發酵提取物中加入丙氨酸時，葡萄發酵提取物500份，丙氨酸5～18份，溶劑10～40份，反應體系的PH值為6～9，回流溫度為60～95℃，反應時間為2～6小時；