[發明專利]一種檢測養殖廢物中雌激素的方法

有效

• 申請號: 201410550857.0
• 申請日: 2014-10-16
• 公開（公告）號: CN105572238B
• 公開（公告）日: 2017-11-10
• 發明（設計）人: 陸雋鶴;宦志榮;孔德洋
• 申請（專利權）人: 無錫市寰創環境科技發展有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/08
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司32218
• 代理人: 徐冬濤,尹慧晶

1.一種檢測養殖廢物中雌激素的方法，其特征在于所述的雌激素為雌二醇，炔雌醇，雌酮，雙酚A；該方法包括以下步驟：

(1)樣品萃取：取養殖場固體廢物3-10g，以體積比為2:1-4:1的二氯甲烷和甲醇的混合溶液為溶劑，在超聲輔助下萃取，合并萃取液，離心，取上清液，用氮氣吹溶劑使之揮發，直至剩余溶液1-2mL；

(2)樣品凈化：取硅膠2-5g，用正己烷活化，裝入徑高比為1：10-15的玻璃柱中，靜置，待固體沉降完全，排放正己烷，使其液面和硅膠柱齊平，制備得到凈化小柱；

將步驟(1)得到的樣品用正己烷溶解，再上載到凈化小柱，用正己烷清洗，然后用氮氣將硅膠柱吹干；

(3)樣品洗脫：用乙腈洗脫，收集洗脫液，濃縮至1-2ml；

(4)樣品測定：用高效液相色譜-熒光檢測器進行定量分析，熒光檢測器的激發波長和發射波長分別為280nm和310nm；高效液相色譜-熒光檢測器進行分析時采用色譜柱為C₁₈反相柱，流動相為甲醇和水，流速1mL/min，采用梯度洗脫，甲醇初始濃度為30％，在15分鐘內升高到50％并保持10分鐘，然后再在10分鐘內繼續升高到100％，并保持5分鐘。

2.根據權利要求1所述的檢測養殖廢物中雌激素的方法，其特征在于該方法步驟(1)中二氯甲烷和甲醇的混合溶液體的積比為2:1。

3.根據權利要求1所述的檢測養殖廢物中雌激素的方法，其特征在于該方法步驟(1)中所述的萃取條件為萃取2-3次，每次萃取5-15分鐘。

4.根據權利要求1所述的檢測養殖廢物中雌激素的方法，其特征在于步驟(2)所用的硅膠粒徑為過80-100目篩。

5.根據權利要求1所述的檢測養殖廢物中雌激素的方法，其特征在于步驟(3)所用的乙腈用量為2-5mL。

6.根據權利要求1所述的檢測養殖廢物中雌激素的方法，其特征在于步驟(2)硅膠用正己烷活化的具體步驟是將硅膠中加入正己烷攪拌糊狀再倒入玻璃柱。

7.根據權利要求1所述的檢測養殖廢物中雌激素的方法，其特征在于步驟(2)中的玻璃柱的徑高比為1：10。