[發明專利]同步定量聯檢乙肝三項的量子點免疫層析試條及其方法

在審

• 申請號: 201410544442.2
• 申請日: 2014-10-15
• 公開（公告）號: CN104297483A
• 公開（公告）日: 2015-01-21
• 發明（設計）人: 王春英;馬義才;侯飛
• 申請（專利權）人: 成都領御生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/531;G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種同步定量聯檢乙肝三項的量子點免疫層析試條，包括順次搭接固定在底襯（8）上的樣品墊（1）、紅細胞濾膜（2）、標記墊（3）、分析膜（7）、吸水墊（6），分析膜（7）具有T帶（4）和C帶（5），特征在于：標記墊（3）包被有不同波長量子點對應標記的鼠抗HBsAg單抗、鼠抗HBeAg單抗和HBcAg的混合物，分析膜（7）的T帶（4）包被有兔抗HBsAg抗體、兔抗HBeAg抗體、HBcAg的混合物，分析膜（7）的C帶（5）包被有質控物羊抗鼠抗體。

2.根據權利要求1所述的同步定量聯檢乙肝三項的量子點免疫層析試條，特征在于：其中所述量子點包括ZnS、CdS、HgS、ZnSe、CdSe、HgSe、CdTe、ZnTe、ZnO、PbSe、HgTe、CaAs、InP、InAs、InCaAs、CdS/ZnS、CdS/Ag₂S、CdS/PbS、CdS/Cd(0H)₂、CdS/HgS、CdS/HgS/CdS、ZnS/CdS、ZnS/CdS/ZnS、ZnS/HgS/ZnS/CdS、CdSe/CdS、CdSe/ZnS、CdSe/ZnSe、CdSe/CuSe、CdSe/HgTe、CdSe/HgSe、CdSe/HgSe/CdSe、CdTe/HgS、CdTe/HgTe、InAs/InP、InAs/CdSe、InAs/ZnSe、MgS、MgSe、MgTe、CaS、CaSe、CaTe、SrS、SrSe、SeTe、BaS、BaSe、BaTe、CdS:Mn、ZnS:Mn、CdS:Cu、ZnS:Cu、CdS:Tb、ZnS:Tb中的任意一種或任意幾種納米粒子的組合，以及由上述任意一種量子點為核、二氧化硅為殼的核-殼型納米復合粒子。

3.根據權利要求1所述的同步定量聯檢乙肝三項的量子點免疫層析試條，特征在于：所述標記墊（3）為玻璃纖維膜，所述分析膜（7）為硝酸纖維素膜、尼龍膜、或硝酸纖維素/醋酸纖維素混合膜，底襯（8）為聚脂或塑料板。

4.一種如權利要求1所述的同步定量聯檢乙肝三項的量子點免疫層析試條的制備方法，其特征在于，該試條制備方法包括如下步驟：

A.?量子點偶聯抗體/抗原：

a)?取不同波長量子點分別用PBS緩沖液調pH=6-9，加入EDC（l-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳二胺鹽酸鹽）和NHS（N-羥基硫代琥珀酸亞胺）室溫活化10-60min；

b)?分別對應加入鼠抗HBsAg單抗、鼠抗HBeAg單抗和HBcAg旋渦振蕩反應0.5-3h；

c)?分別對應加入BSA封閉反應0.5-2h;

d)?離心純化產物;

e)?取沉淀用PBS緩沖液重懸分散，4℃保存;

B.?試條組件制備：

a)?樣品墊（1）:??選用纖維素膜切成一定規格的膜塊，將該膜塊放入含有0.1%-10%?BSA和0.01%-10%?Tween?20的PBS中浸泡，取出，干燥備用；

b)?紅細胞濾膜（2）：選紅細胞濾膜切成一定規格膜塊，干燥備用；

c)?標記墊（3）：選用玻璃纖維膜切成一定規格膜塊，加入用不同波長量子點對應標記的鼠抗HBsAg單抗、鼠抗HBeAg單抗和HBcAg的混合物溶液于該膜塊上，干燥膜塊備用；

d)?分析膜（7）：?選用纖維素膜切成一定規格的膜塊，自膜塊底邊起由下自上相隔一定距離分別噴點0.5-10mg/ml?兔抗HBsAg抗體、0.5-10mg/ml兔抗HBeAg抗體、0.5-10mg/ml?HBcAg的混合物作T帶（4），噴點0.5-10mg/ml質控物羊抗鼠抗體作C帶（5），干燥膜塊備用；

e)?吸水墊（6）：?選用具有吸水作用的纖維素膜切成一定規格的膜塊，干燥備用；

C.?試條組件組裝：

上述制備好的試條組件按樣品墊（1）、紅細胞濾膜（2）、標記墊（3）、分析膜（7）、吸水墊（6）順次搭接粘貼于底襯（8）上，切成一定規格的試條，裝入塑料盒中，與干燥劑一起裝入鋁箔袋內密封儲存。