[發明專利]一種建立含有Rickettisa菌和不含Rickettisa菌的煙粉虱種群的方法有效
| 申請號： | 201410539648.6 | 申請日： | 2014-10-11 |
| 公開（公告）號： | CN104285906A | 公開（公告）日： | 2015-01-21 |
| 發明（設計）人： | 楊義婷;郭建洋;萬方浩;劉萬學;劉懷 | 申請（專利權）人： | 中國農業科學院植物保護研究所 |
| 主分類號： | A01K67/033 | 分類號： | A01K67/033 |
| 代理公司： | 北京法思騰知識產權代理有限公司 11318 | 代理人： | 高宇 |
| 地址： | 100093 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 建立 含有 rickettisa 煙粉虱 種群 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種建立含有Rickettisa菌和不含Rickettisa菌的煙粉虱種群的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
(1)采集煙粉虱種群，在實驗室培養，其中光照條件為白天14h：黑夜10h，相對濕度為75％～85％；
(2)待種群量相對較大時，選取出若干煙粉虱于顯微鏡下觀察辨別雌雄；
(3)取已長出兩片真葉的甜瓜苗，用養蟲籠夾在甜瓜苗的葉片上，吸取雌雄煙粉虱各一頭，接于甜瓜葉片的背面；
(4)3-4天過后，將養蟲籠的煙粉虱取出，將甜瓜在以下條件下培養，光照條件為白天14h：黑夜10h，相對濕度為75％～85％；
(5)提取單頭煙粉虱的DNA，然后利用PCR方法對其DNA進行分子鑒定，所用引物如以下，利用煙粉虱內共生菌鑒定引物，鑒定種群內共生菌情況，
引物序列(5′→3′)
F：CGCTTCAGCAATTACCGT
R：GAACTACTACACCTCCAA
；
(6)待煙粉虱羽化后，取同一養蟲籠里的雌雄煙粉虱，重復(3)～(5)步驟；
(7)純化至得到穩定的種群。
2.根據權利要求1所述的建立含有Rickettisa菌和不含Rickettisa菌的煙粉虱種群的方法，其特征在于，經過連續單頭飼養并純化5代，即可以得到穩定的含菌種群和無菌種群。
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