[發明專利]一種檢測血清肌酐的金納米粒子生物傳感器及其制備方法

有效

• 申請號: 201410534807.3
• 申請日: 2014-10-11
• 公開（公告）號: CN104345053A
• 公開（公告）日: 2015-02-11
• 發明（設計）人: 高文華;黃曉鵬;陳耀文;張嘉宏;陳佳陽;陳圖鋒;張曉珊
• 申請（專利權）人: 汕頭大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N21/78
• 代理公司: 廣州三環專利代理有限公司 44202
• 代理人: 溫旭

技術領域

本發明涉及分析化學與納米材料光譜分析領域，具體涉及一種檢測血清肌酐的金納米粒子生物傳感器及其制備方法。

背景技術

近年來，金納米粒子（AuNPs）作為一種生物化學納米傳感探針，憑借著簡單快速、容易合成、高比表面積和獨特的光學性質等優點，越來越受到研究者的關注。同時，金納米粒子的分散狀態（酒紅色）或聚集狀態（藍色）又能作為比色分析的重要依據。比色分析法是開始于十九世紀三、四十年代的一種定量分析的方法，通過比較或測量有色物質溶液顏色深度來確定待測組分含量。選擇適當的顯色反應和控制好適宜的反應條件，是比色分析的關鍵。

共振光散射（RLS）技術是在1993年由Pasternack等提出的、在普通熒光分光光度計上進行的檢測技術，最早應用于生化分析中，因其具有簡便、快速、靈敏度高等一系列的優點，也被應用于其它領域，如：藥物分析、納米材料等。共振光散射技術是一種利用光散射現象建立的測試方法。光散射指的是當光束通過某種介質時，從入射光方向以外所觀察得到的現象，該現象廣泛地存在于光與粒子的作用當中。當介質中的電子受到光電磁波的電場振動時，形成偶極振子，偶極振子從而向各個方向發射電磁波，即為光散射波。顯然，散射波會隨著介質粒徑大小而產生不同。當粒徑（r）遠大于入射光波長（λ₀）時，產生的散射可看作是反射和折射；如果粒徑與入射光波長接近，便產生丁達爾（Tyndall）?散射；如果粒徑很小，且20r?≤λ₀?時，則產生以瑞利散射為主的分子散射。在普通的熒光分光光度計上選擇合適的激發和發射通帶寬度，采用相等的激發和發射波長同時掃描激發和發射單色器后所得的同步光譜(△λ=0nm)即為散射粒子的共振光散射光譜(RLS)。共振光散射光譜法只需要普通熒光分光光度計，調節激發光波長和發射光波長相等，即可獲得待測組分所引起的共振光散射強度。大量數據實驗表明，共振光散射強度與共振光散射粒子的濃度在一定范圍內有線性關系，據此可直接進行定量分析。

肌酐是一種含氮的有機非蛋白類化合物，是肌酸分解代謝的最終產物，包括血清肌酐和尿肌酐。人體血清肌酐的含量直接反映腎功能的健康程度。在臨床醫學檢驗中，血清肌酐的含量是檢驗腎功能的其中一個特異性指標。當腎臟機能受損時，血清肌酐的正常排泄受到阻礙，使血清肌酐含量增加，即血清中肌酐含量升高意味著腎功能受到損害，故血清肌酐的測定在臨床診斷中有非常重要的意義。人類血清肌酐的合理生理濃度為40~150?μmol/L，當血清肌酐濃度超過150?μmol/L，說明血清肌酐濃度過高，表明此時腎臟已經受到一定程度的損害；當血清肌酐濃度超過250?μmol/L，就需要進行腎透析。目前為止，血清肌酐的濃度在臨床上仍然是一個決定是否需要進行腎臟透析的重要參考指標。

目前測定血清肌酐的主要方法有化學測定法（堿性苦味酸法）、非酶電化學生物傳感法、電化學分析法、拉曼散射法、毛細管電泳法、同位素稀釋質譜法、基于納米安培電流生物傳感法及高效液相層析法等。這些方法在血清肌酐的檢測上雖然都顯示出一定的靈敏度和選擇性，但是仍然存在著許多缺陷，如：實驗操作和樣品前處理復雜、耗時，特異性差，需要昂貴的儀器等。因此，開發快速簡單、低成本且具有良好性能和較寬線性范圍的傳感器是必要的，其對腎病患者會起到積極的作用，且對于血清肌酐分析方法的發展及其在生物化學、藥學和臨床上的應用都具有十分重要的意義。

發明內容

本發明的一個目的在于提供一種檢測血清肌酐的金納米粒子生物傳感器的制備方法的制備方法。

?具體地，該制備方法包括以下步驟：

（1）制備金納米粒子溶液；

（2）加入還原型谷胱甘肽溶液作為抗聚集劑，混合均勻，對金納米粒子進行表面保護；

（3）分別加入不同濃度的標準血清肌酐溶液，利用熒光分光光度計進行定量檢測，得出血清肌酐濃度與共振光散射強度的關系曲線圖，即得到所述的金納米粒子生物傳感器。