[發明專利]一種二乙酰精胺的檢測試劑盒及制備方法和應用

有效

• 申請號: 201410531126.1
• 申請日: 2014-10-10
• 公開（公告）號: CN104316685A
• 公開（公告）日: 2015-01-28
• 發明（設計）人: 李文欣;劉峰
• 申請（專利權）人: 遼寧邁迪生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/531;G01N33/574
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 周秀梅;李穎

技術領域

本發明涉及生物學檢測方法，其特征在于具體的說是一種二乙酰精胺的檢測試劑盒及制備方法和方法。

背景技術

診斷試劑在疾病的預防和診斷方面有很大的作用，作為生物制藥的子行業，診斷試劑在20多年的發展過程中，其應用范圍不斷擴大，在疾病的預防和愈后的檢測中正發揮著越來越大的作用，商業價值也不斷凸顯。2010年我國診斷試劑行業在新醫改、國家在生物醫藥領域重點扶持診斷試劑行業發展的背景下，我國診斷試劑市場規模達到40億元人民幣左右。目前我國診斷試劑的市場份額只僅占世界市場的2％左右，這與我國的人口數量和醫療需求是相當不匹配的，隨著我國國民經濟水平和健康意識的提高，這種差距將會成為診斷試劑行業增長的巨大空間。從國際上看，美國FDA已批準的診斷試劑近700種，名列世界各國之首，但與世界衛生組織所屬全球疾病統計分類協會宣布的全球已確知的12000種疾病相比，需求潛力仍非常大。國內臨床檢驗市場經過幾年的快速發展，一些重要的臨床產品項目已經進入成熟期，發展速度有所減緩，但仍然有20％～30％的增長。目前，同國際上的幾百種產品相比，國內市場還遠沒有得到開發，具有巨大的市場潛力。即使從目前需求較大、發展比較成熟的幾個病種來看，市場仍有很大的發展潛力。

體外診斷行業是一個充滿活力和前景的領域。目前，全球體外診斷產業規模在200億美元的水平。另外，老年人口群體的不斷擴大，分子診斷學技術日益進步，都給體外診斷市場的發展帶來了積極的影響。我國已批準上市的免疫診斷試劑有387種，這些產品主要集中在肝炎及性病的臨床診斷上，僅乙肝一項就占了62％，說明國內的體外診斷試劑品種比較單一。國內體外診斷試劑行業在基礎技術研究方面投入較少，幾乎沒有自己的專利技術和知識產權。一些國內產品不能跨出國門，國際競爭力非常弱。

癌癥是一個全球性公共健康問題。尤其在中國這樣一個發展中國家，醫學和衛生水平均不及西方發達國家先進，腫瘤發病率很高并且仍在繼續升高，其中很大一部分由于發現不及時造成發現時即為晚期，錯過了最佳治療時間。所以如果能在腫瘤發生的早期檢測出相關指標，就能做到腫瘤的早期發現、早期診斷、早期治療，就可以大大降低腫瘤患者的死亡率，全面提高生存質量和生活質量。同時，開發的體外診斷試劑也可以填補腫瘤體外診斷的國內空白。

目前，早期診斷癌癥的最新、最有效的方法是通過驗血檢測腫瘤標志物，特別是其中的蛋白標志物。利用分子生物學、免疫學原理，制成能特異性檢測腫瘤標志物的體外診斷試劑，能在早期準確的診斷癌癥的發生，為治療提供有效依據；針對個體差異，指導臨床藥物選擇；以及在治療后的療效監測、預后和復發監測等方面都有重大意義。

發明內容

本發明目的在于提供一種二乙酰精胺的檢測試劑盒及檢測方法和方法。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案為：

一種二乙酰精胺的檢測試劑盒，包括試紙條干燥劑和吸管，試紙條從加樣端依次為玻璃纖維素膜、金墊、NC膜、吸水紙；金墊上包被有膠體金標記的二乙酰精胺(DiAcSpm)和肌酐(CRE)的單克隆抗體及羊抗兔抗體；NC膜上的檢測區(T)有DiAcSpm和CRE的抗原、標準區(C)有羊抗兔或羊抗鼠抗體。

所述DiAcSpm抗原為乙酰基精胺(AcSpm)同牛血清白蛋白(BSA)偶聯所得；所述DiAcSpm抗體由乙酰基精胺(AcSpm)同牛血清白蛋白(BSA)偶聯再免疫小鼠，而獲得DiAcSpm單克隆抗體；所述CRE抗原為CRE同牛血清白蛋白(BSA)或牛甲狀腺球蛋白(BTG)偶聯所得；所述CRE抗體為CRE同牛血清白蛋白(BSA)或牛甲狀腺球蛋白(BTG)偶聯再免疫鼠或羊，而獲得CRE單克隆抗體。

上述抗原和抗體也可通過市購獲得。

所述金墊上包被有膠體金標記的二乙酰精胺(DiAcSpm)和肌酐(CRE)的單克隆抗體及羊抗兔抗體的制備采用鋪金或噴金的方式獲得。

所述鋪金或噴金的方式，分別向經調整PH值的膠體金中加入DiAcSpm和CRE的單克隆抗體，以及兔抗體，靜置5-15min后分別加入20％BSA進行封閉，再次靜置5-15min,靜置后分別離心收集沉淀，所得沉淀再分別用復溶液復溶，所得復溶后的溶液混勻后均勻鋪在或噴在玻璃纖維素膜或聚酯纖維素膜上，真空凍干、真空抽干或烘干后即得到包被有膠體金標記的二乙酰精胺(DiAcSpm)和肌酐(CRE)的單克隆抗體及羊抗兔抗體的金墊；