[發明專利]末端側鏈-尾鏈連接手性二酸修飾多肽化合物及合成方法

有效

• 申請號: 201410528075.7
• 申請日: 2014-10-09
• 公開（公告）號: CN105566456B
• 公開（公告）日: 2019-03-19
• 發明（設計）人: 李子剛;趙輝
• 申請（專利權）人: 北京大學深圳研究生院
• 主分類號: C07K7/56
• 分類號: C07K7/56;C07K7/06;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 上海精晟知識產權代理有限公司 31253
• 代理人: 馮子玲

本發明公開了一種含有末端側鏈?尾鏈連接手性二酸修飾的多肽化合物及其合成方法，其結構式如式(Ⅰ)所示：本發明的多肽的合成方法包括如下步驟：(1)含有手性二酸的多肽的固相合成；(2)用鈀催化劑同時脫去二酸保護基Allyl(烯丙基)和氨基保護基Alloc(烯丙氧羰基)；(3)在六氟磷酸苯并三唑?1?基?氧基三吡咯烷基磷/1?羥基苯并三唑條件下分子內酰胺基關環，獲得多肽；(4)將步驟(3)的多肽從固相切下，經分離純化獲得含有末端側鏈?尾鏈連接手性二酸修飾多肽，并通過圓二色譜等方法評價驗證多肽的螺旋性，用熒光顯微鏡成像評價多肽的穿膜性。本發明的多肽及其合成方法成本低、簡單高效，對于穩定多肽α?螺旋，提高其成藥性有重要意義。

技術領域：

本發明屬于化學生物學穩定多肽方法學領域，具體涉及一種含有末端側鏈-尾鏈連接手性二酸修飾的多肽化合物及其合成方法。

背景技術：

多肽類藥物由于其相對于小分子更強的生物分子識別能力，極高的分子進化潛能等特點越來越引起醫藥行業的關注。但同時多肽類藥物存在生物利用度低，難以作用于胞內靶點，組織穿透性差等缺點。

統計數據表明α-螺旋大約占蛋白質結構的近30％，這種二級結構在蛋白質與其它生物分子的識別過程中起關鍵作用，故α-螺旋在生物醫藥領域有很高的開發前景。然而，截取自天然蛋白的短肽因為接合面減少造成的焓損失以及難以折疊帶來的較高的熵罰難以與靶點有效的結合，加上其易被降解使之成藥性很低。

自上世紀八九十年代以來，化學生物學家開始嘗試利用各種化學手段來穩定或直接模擬α螺旋。其中穩定方法包括利用各種化學(二硫鍵、酰胺鍵、酰胺鍵、烯烴復分解等)共價或者非共價連接側鏈，或者利用末端修飾成核誘導螺旋。穩定螺旋可以提高短肽與靶點結合的能力、穩定性以及穿透細胞膜的能力。

上述穩定方法各有不同程度的缺陷。除了一些方法(離子鍵、二硫鍵)在穩定性上的缺陷，側鏈-側鏈連接對多肽與靶點結合的影響難以預測，導致篩選成本增加。基于末端修飾成核誘導螺旋的氫鍵替代策略需要較為繁瑣的氮烷基化模塊的構建等等。

發明內容：

本發明的目的是提供一種含有末端側鏈-尾鏈連接手性二酸修飾的多肽化合物，該含有手性二酸修飾的多肽化合物，具有穩定的α-螺旋結構。本發明的另一目的是提供該多肽化合物的合成方法。本發明的末端手性二酸可以有效的穩定短肽螺旋，提高多肽穩定性。同時該方法原料廉價，合成簡便高效。該方法還具有序列耐受性好、擁有額外修飾位點等優點。

為了實現上述目的，本發明采用如下的技術方案：

本發明首先提供一種含有末端側鏈-尾鏈連接手性二酸修飾的多肽化合物，其結構通式如式(Ⅰ)所示：

其中，R為任意氨基酸殘基，n為1～2的正整數，R₁、R₂連接的碳原子至少一個為手性碳原子，且R₁、R₂各自獨立地選自氫、烷基、氨基或其衍生物取代基和羥基或其衍生物取代基中的一種。

本發明中，所述的手性二酸選自酒石酸或其衍生物、谷氨酸或其衍生物和天冬氨酸或其衍生物中的一種。

本發明中，所述的手性二酸為L型酒石酸或其衍生物。

本發明中，所述的手性二酸為手性中心位于N端β位的乙酰化天冬氨酸或其衍生物。

本發明中，所述多肽的長度大于或等于5個氨基酸。

本發明中，所述R為L型氨基酸或D型氨基酸。

本發明中，所述R為α氨基酸或β氨基酸。

本發明中，所述n為1。

本發明還提供了一種含有末端側鏈-尾鏈連接手性二酸修飾的多肽化合物的合成方法，所述方法包括如下步驟：