[發(fā)明專利]一種草果與草豆蔻的指紋圖譜鑒別方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410528048.X
• 申請(qǐng)日: 2014-10-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104297373A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-01-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 覃潔萍;何俏明;李耀華;梁臣艷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣西中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種草果與草豆蔻的指紋圖譜鑒別方法，其特征在于該法是一種采用溶劑超聲輔助萃取或冷浸提取制備供試液，采用GC-MS方法在一定條件下測(cè)得指紋圖譜并用于鑒別的方法，具體包括以下測(cè)定條件及步驟：

(1)供試品溶液的制備：取草果和草豆蔻藥材粉末4-6克，精密稱定，分置于兩個(gè)錐形瓶中，分別加入萃取溶劑20-30ml，冷浸24小時(shí)或超聲輔助萃取30-40分鐘，放冷，加萃取溶劑補(bǔ)足失去的重量，過(guò)濾，取續(xù)濾液置離心管中，用無(wú)水硫酸鈉干燥去除水分，以13000r/min離心10分鐘，取上清液，即得草果和草豆蔻藥材的供試品溶液；

(2)色譜分析條件：HP-5MS?UI彈性石英毛細(xì)管色譜柱，其規(guī)格為30m×0.25mm×0.25μm；載氣為高純He，純度≥99.99％，流量1.0ml/min；進(jìn)樣口溫度250℃；不分流進(jìn)樣；程序升溫程序?yàn)椋撼跏紲囟?0℃，保持3min，以6℃/min升至180℃，保持3min；

(3)質(zhì)譜分析條件：電離方式為EI，電子能量70eV，檢測(cè)器溫度280℃，離子源溫度230℃，四級(jí)桿溫度150℃，倍增電壓1782v，發(fā)射電流34.6μA，掃描質(zhì)量范圍：50-500amu；溶劑延遲3.0min；

(4)測(cè)定法：分別取草果和草豆蔻的供試液各1μl，注入GC-MS聯(lián)用儀，測(cè)定草果和草豆蔻的總離子流圖，即得兩藥材的GC-MS指紋圖譜；

(5)標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的建立：測(cè)定10批不同產(chǎn)地草果與草豆蔻的GC-MS指紋圖譜，應(yīng)用計(jì)算機(jī)對(duì)指紋圖譜的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析對(duì)比，計(jì)算得出草果與草豆蔻的GC-MS指紋圖譜的共有模式，作為草果與草豆蔻藥材的鑒別用標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜；

(6)應(yīng)用：將待測(cè)樣品的GC-MS指紋圖譜分別與草果與草豆蔻藥材的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜進(jìn)行對(duì)比，根據(jù)特征指紋峰位及主要特征峰面積的大小，即可確定藥材的品種與質(zhì)量。

2.如權(quán)利要求1所述的指紋圖譜鑒別方法，其特征在于所述的萃取溶劑是乙酸乙酯、二氯甲烷或石油醚。

3.如權(quán)利要求1所述的指紋圖譜鑒別方法，其特征在于所述的最佳萃取溶劑為乙酸乙酯，所需最佳萃取溶劑量為藥材的4-5倍，超聲萃取時(shí)間為30分鐘。

4.如權(quán)利要求1所述的指紋圖譜鑒別方法，其特征在于：草果指紋圖譜共有模式中具有16個(gè)共有特征峰，各特征峰對(duì)應(yīng)的化學(xué)成分分別是：1號(hào)峰：α-蒎烯，2號(hào)峰：β-蒎烯，3號(hào)峰：α-水芹烯，4號(hào)峰：桉油精，5號(hào)峰：α-松油醇，6號(hào)峰：順式-檸檬醛，7號(hào)峰：香葉醇，9號(hào)峰：反式-檸檬醛，10號(hào)峰：trans-2，3，3α，7α-tetr-ahydro-1H-indene-4-carbaldehyde，11號(hào)峰：cis-2，3，3α，7α-tetr-ahydro-1H-indene-4-carbaldehyde，12號(hào)峰：2，3-二氫-1H-茚-4-甲醛，13號(hào)峰：乙酸香葉酯，14號(hào)峰：順式-環(huán)癸烯，15號(hào)峰：反式-2-十二烯醛，16號(hào)峰：橙花叔醇，其中以桉油精的相對(duì)含量為最高；草豆蔻指紋圖譜共有模式中具有13個(gè)共有特征峰，各特征峰對(duì)應(yīng)的化學(xué)成分分別是1號(hào)峰：α-蒎烯，2號(hào)峰：莰烯，3號(hào)峰：α-水芹烯，4號(hào)峰：對(duì)-聚傘花烴，5號(hào)峰：桉油精，6號(hào)峰：樟腦，7號(hào)峰：L-(-)-龍腦，8號(hào)峰：(-)-4-萜品醇，9號(hào)峰：4-苯基-2-丁酮，10號(hào)峰：反式-桂皮醛，11號(hào)峰：α-石竹烯，12號(hào)峰：δ-杜松烯，13號(hào)峰：金合歡醇；其中以金合歡醇的相對(duì)含量為最高。

5.權(quán)利要求1所述的指紋圖譜鑒別方法在草果和草豆蔻藥材的鑒別與質(zhì)量控制方面的應(yīng)用。