[發明專利]一種甲磺酸達比加群酯含量的檢測方法

有效

• 申請號: 201410526324.9
• 申請日: 2014-10-08
• 公開（公告）號: CN105572275B
• 公開（公告）日: 2017-09-29
• 發明（設計）人: 姜明;趙迎春;馮新光
• 申請（專利權）人: 華仁藥業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 青島聯信知識產權代理事務所(普通合伙)37227
• 代理人: 高洋

技術領域

本發明屬醫藥技術領域，具體而言，主要涉及甲磺酸達比加群酯含量的檢測方法。

背景技術

達比加群酯（Pradaxa）是德國勃林格殷格翰公司研發生產的口服直接凝血酶抑制劑，它是達比加群（Dabigatran）的前體藥物，甲磺酸達比加是在達比加的基礎上經過磺化反應生成的產物。于2008年4月首次在德國和英國上市。達比加群酯具有直接抗凝血活性，與其他藥物作用少，可直接口服，無需進行凝血測試，也不用改變飲食習慣，是預防中風的推薦藥物。2008年歐盟獲準用于全髖或全膝關節置換術后靜脈血栓的預防，2010年FDA批準用于降低非瓣膜性房顫患者預防血栓和腦卒中的發生。甲磺酸達比加群酯是及華法林之后50年來首個上市的全新口服直接抗凝血藥物，是抗凝血治療領域和潛在致死性血栓領域的一項重大突破。

進口藥品注冊標準中的檢測方法流速太大，對于硬件要求較高，而且峰純度因子小于990，峰不純。目前尚沒有甲磺酸達比加群酯的有效檢測方法，為了便于合成人員分析產率，特研究該分析方法，能夠簡單、快速而準確的測定其含量。

發明內容

本發明的目的在于公開一種有效且簡單的檢測甲磺酸達比加群酯含量的方法，能更好地對甲磺酸達比加含量進行控制，指導工藝研究，提高產品質量。

一種甲磺酸達比加群酯含量的檢測方法，具體的步驟如下：

1）色譜條件：HPLC法測定甲磺酸達比加群酯的色譜條件如下，色譜柱：phenomenex Gemini C18（150×4.6mm,5μm）；流動相：A：0.01mol/L的乙酸銨水溶液，乙酸調節pH至6.5；B ：甲醇；A：B=35：65等度洗脫；流速，1ml/min；柱溫：30℃；DAD檢測器；檢測波長272nm進樣量：10μl。

2）檢測溶液的配制：

對照品溶液：精密稱取甲磺酸達比加群酯對照品適量，用甲醇溶解，定容，制成每1ml中含甲磺酸達比加群酯1mg的溶液；

供試品溶液：精密稱取甲磺酸達比加群酯供試品適量，用甲醇溶解，定容，制成每1ml中含供試品1mg的溶液。

分別精取對照液和供試液各10μl，注入色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算，即得甲磺酸達比加群酯的標示量。

本發明的優點在于：

通過有效的高效液相色譜法，檢測甲磺酸達比加群酯的含量，對其含量進行精確檢測，有利于優化工藝，提高產品質量。

附圖說明

圖1為甲磺酸達比加群酯供試品的色譜圖；

圖2為甲磺酸達比加群酯對照品色譜圖；

圖3為甲磺酸達比加群酯濃度與峰面積線性圖。

具體實施方式

實施例1

準確稱取10mg甲磺酸達比加群酯標準品溶于10ml容量瓶中， 用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成濃度為 1mg/ml 的標準溶液。

按上述方法準確配制育亨賓標準溶液， 經 0.2μm 微孔濾頭過濾后注入液相色譜儀中，按本發明確定的方法。所述的5個不同濃度的育亨賓標準溶液分別為0.8mg/ml，0.9mg/ml，1.1mg/ml，1.2mg/ml。以峰面積 (Y) 為縱坐標，樣品濃度 (X) 為橫坐標進行線性回歸， 得 r ＝ 0.999， 線性關系很好， 見圖3。

其中，色譜柱：phenomenex Gemini C18（150×4.6mm,5μm）；流動相：A：0.01mol/L的乙酸銨水溶液，乙酸調節PH至6.5；B ：甲醇；A：B=35：65等度洗脫；流速，1ml/min；柱溫：30℃；DAD檢測器；檢測波長272nm進樣量：10μl。

色譜條件：HPLC法測定甲磺酸達比加群酯的色譜條件如下，色譜柱：phenomenex Gemini C18（150×4.6mm,5μm）；流動相：A：0.01mol/L的乙酸銨水溶液，乙酸調節PH至6.5；B ：甲醇；A：B=35：65等度洗脫；流速，1ml/min；柱溫：30℃；DAD檢測器；檢測波長272nm進樣量：10μl。

1）試驗針對色譜柱的柱溫、流速、流動相A（緩沖鹽）pH進行了一系列的條件篩選。首先，將色譜柱的柱溫在原有30℃的條件下分別升高和降低5℃進行試驗，結果發現，柱溫在30℃時，甲磺酸達比加群酯（以下用DEM表示）色譜條件最佳。