[發明專利]一種植物乳桿菌及其高密度培養的方法

無效

• 申請號: 201410516317.0
• 申請日: 2014-09-30
• 公開（公告）號: CN104357348A
• 公開（公告）日: 2015-02-18
• 發明（設計）人: 王連民;劉珂飛;郗宏波
• 申請（專利權）人: 天津生機集團股份有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/25
• 代理公司: 天津市三利專利商標代理有限公司 12107
• 代理人: 仝林葉

技術領域

本發明涉及一種植物乳桿菌及其高密度培養的方法。?

背景技術

植物乳桿菌作為胃腸道的益生菌群，具有維持腸道內菌群平衡、提高機體免疫力和促進營養物質吸收等多種功能，通過胃并定植于腸道發揮有益作用，無論在食品發酵，還是在工業乳酸發酵以及醫療保健等領域，都有著廣泛的應用。?

發明內容??

本發明的目的在于提供一株植物乳桿菌及其高密度培養的方法。

本發明的目的是通過以下技術方案實現的：?

????一株植物乳桿菌，所述植物乳桿菌(Lactobacillus?plantarum?LP-SJ)是分離自養殖場附近土壤中的一株益生菌，具有酸耐受性、膽鹽耐受性及抑制常見腸道致病菌等特性；該菌株分類命名為：植物乳桿菌Lactobacillus?plantarum；菌株的保藏編號為：CGMCC?No.9513；保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏單位地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏日期：2014年8月15日。

一種如上所述的植物乳桿菌的高菌體密度培養的方法，包括以下步驟：?

???（1）菌種的活化：

將冷凍保存的植物乳桿菌(Lactobacillus?plantarum?LP-SJ)接種于MRS液體培養基中，37°C培養15-20小時，如此傳代培養2-3次后得到活化菌種；

???（2）培養基的配制：

將優化培養基各成份按比例配制，混合均勻后，pH值自然，121℃下滅菌20min；

???（3）種子發酵液的制備：

取步驟（1）中活化好的菌種接種于（2）中配制的培養基中，37°C培養12-15h；

???（4）接種與培養

將步驟（3）的種子發酵液接種于（2）配制的培養基中，在控制的發酵條件下發酵6-8h：

???（5）終止發酵

當菌體停止產酸時終止發酵，得到植物乳桿菌的高密度發酵液。可根據pH不再降低來判斷是否到達發酵終點。發酵活菌數可以達到7x10⁹以上。

本發明的植物乳桿菌LP-SJ是分離自養殖場附近土壤中的一株益生菌，具備優良的益生特性，經研究表明該菌株具有良好的酸耐受性、膽鹽耐受性及抑制常見腸道致病菌生長特性。植物乳桿菌LP-SJ可改善機體內的微生態環境、提高免疫力、增強抵抗力。植物乳桿菌LP-SJ作為一種益生菌，在動物飼料及醫療保健等領域具有廣泛的應用前景和巨大經濟效益。?

植物乳桿菌的工業化生產中，高密度發酵技術對其有著重要影響，工業發酵的基本目標是以最小的代價獲得最大的產值和利潤，因此優良的培養基、高效的發酵方式是保證工業化生產的必要因素。?

本發明是一株從養殖場附近的土壤中分離，并經過體外耐酸性試驗、耐膽酸鹽試驗、抑制有害菌等一系列試驗篩選得到的具有潛在益生作用的植物乳桿菌(Lactobacillus?plantarum?LP-SJ)，通過優化液體培養基以及對培養條件的控制等方法實現高密度發酵。發酵活菌數高，發酵時間短，成本低廉，適合于工業化生產。?

具體實施方式

下面結合實施例，對本發明進一步說明，下述實施例是說明性的，不是限定性的，不能以下述實施例來限定本發明的保護范圍。

實施例1?一株植物乳桿菌，所述植物乳桿菌(Lactobacillus?plantarum?LP-SJ)是分離自養殖場附近土壤中的一株益生菌，具有酸耐受性、膽鹽耐受性及抑制常見腸道致病菌等特性；該菌菌株已于2014年8月?15日在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物菌種保藏中心專利保藏，保藏號為CGMCC?No.9513?。?

實施例2?本發明所述的植物乳桿菌的益生特性?

1.耐酸及耐膽鹽能力

將收集的植物乳桿菌LP-SJ菌泥用無菌生理鹽水洗滌2次，以原體積的十分之一制成懸浮液，以1%（v/v）的接種量分別接種于pH為1.5、2.0、2.5、3.0、3.5和膽鹽濃度為0%、0.1%、0.3%、0.5%、0.7%的MRS培養基中，37°C恒溫培養4h。每2h取樣進行活菌計數，每組三個平行，取平均值。在不同