[發明專利]固相合成胸腺肽α1

在審

• 申請號: 201410509534.7
• 申請日: 2014-09-28
• 公開（公告）號: CN104327181A
• 公開（公告）日: 2015-02-04
• 發明（設計）人: 白俊才;張國慶;張若平
• 申請（專利權）人: 上海昂博生物技術有限公司
• 主分類號: C07K14/575
• 分類號: C07K14/575;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 張睿

1.一種胸腺肽α1的固相合成方法，所述方法包括步驟：

以固相合成樹脂為起始原料，按照固相合成的方法依次連接具有Fmoc保護基團的氨基酸或多肽，獲得保護的二十八肽樹脂，其間依次脫去Fmoc-保護基團，用縮合劑進行接肽反應，得保護的二十八肽樹脂后，同步進行脫側鏈保護基團及切肽，獲得胸腺肽α1，其特征在于，所述方法在35-85℃下進行。

2.如權利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述方法在40-80℃下進行。

3.如權利要求2所述的合成方法，其特征在于，所述方法在45-70℃下進行。

4.如權利要求3所述的合成方法，其特征在于，所述方法在50-60℃下進行。

5.如權利要求1所述的合成方法，其特征在于，進行縮合時的溶劑是二甲基甲酰胺(DMF)；所述縮合劑為DIC/HOBt。

6.如權利要求1所述的合成方法，其特征在于，脫去Fmoc-保護基團的時間為20秒-4分鐘。

7.如權利要求6所述的合成方法，其特征在于，連續兩次脫去Fmoc-保護基團，一次進行20-40秒，一次2-4分鐘。

8.如權利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述接肽反應時間為5-25分鐘。

9.如權利要求1所述的合成方法，其特征在于，依次連接具有Fmoc保護基團的氨基酸，獲得保護的二十八肽樹脂，依次包括如下步驟：

(a)裝載Fmoc-Asn(Trt)-Wang樹脂；

(b)在35-85℃下，用含有DMF的溶液連續兩次進行脫保護處理，然后樹脂用DMF洗滌；

(c)在35-85℃下在DMF中使用DIC/HOBt進行接肽反應，然后再加入脫保護劑處理，再加入具有Fmoc保護基團的氨基酸，如此重復，獲得Fmoc-Ser¹(tBu)-Asp²(OtBu)-Ala³-Ala⁴-Val⁵-Asp⁶(OtBu)-Thr⁷(tBu)-Ser⁸(tBu)-Ser⁹(tBu)-Glu¹⁰(OtBu)-Ile¹¹-Thr¹²(tBu)-Thr¹³(tBu)-Lys¹⁴(Boc)-Asp¹⁵(OtBu)-Leu¹⁶-Lys¹⁷(Boc)-Glu¹⁸(OtBu)-Lys¹⁹(Boc)-Lys²⁰(Boc)-Glu²¹(OtBu)-Val²²-Val²³-Glu²⁴(OtBu)-Glu²⁵(OtBu)-Ala²⁶-Glu²⁷(OtBu)-Asn²⁸(Trt)-樹脂。

10.如權利要求1-9任一項所述的合成方法，其特征在于，所述方法中還包括將獲得的胸腺肽α1經制備HPLC進行純化，所述純化方法采用下述的一種或一種以上溶液作為流動相：pH5-8的醋酸銨溶液、pH3-5的磷酸鹽溶液、pH1-3的磷酸溶液。