[發(fā)明專利]鏈霉菌菌株及其防治油菜菌核病聯(lián)合應用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410509418.5
• 申請日: 2014-09-29
• 公開（公告）號: CN104312948A
• 公開（公告）日: 2015-01-28
• 發(fā)明（設計）人: 馬正;俞曉平;路丹丹;羅帥;邊亞琳;王正亮;申屠旭萍
• 申請（專利權）人: 中國計量學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/00;A01P3/00;C12R1/59;C12R1/485
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 林松海

1.?一種鏈霉菌菌株，其特征在于：菌株M527分類命名為龜裂鏈霉菌（Streptomyces?rimosus）M527，保藏單位：中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏日：2013年6月19日，保藏登記號為CCTCC?NO:?M?2013270；另一種鏈霉菌菌株M930，菌株M930分類命名為金色鏈霉菌（Streptomyces?aureofaciens）M930，保藏單位：中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏日：2013年12月25日，保藏登記號為CCTCC?NO:?M?2013711。

2.?一種如權利要求1所述的鏈霉菌菌株的應用，其特征在于：所述的龜裂鏈霉菌M527和金色鏈霉菌M930均能發(fā)酵產(chǎn)生對油菜菌核病菌（Sclerotinia?sclerotiorum（Lib.）de?Bary）具有較強拮抗作用的活性物質，可防治油菜菌核病病害，M527和M930兩者的代謝產(chǎn)物重量百分比為4:1時，效果尤為顯著。

3.?權利要求2所述的應用，其特征在于：所述的M527和M930兩者的代謝產(chǎn)物的制備方法如下：

（1）將分離得到的龜裂鏈霉菌M527和金色鏈霉菌M930涂布于甘露醇黃豆餅粉制成的MS平板上，收集孢子接種于發(fā)酵培養(yǎng)基；

（2）發(fā)酵培養(yǎng)基為每1?L中含有黃豆餅粉10g，玉米粉4g，可溶性淀粉20g，葡萄糖5g，蛋白胨5g，CoCl_2?0.02g，牛肉膏5g，CaCO_3?5g，酵母膏5g，每300mL三角瓶裝發(fā)酵培養(yǎng)液50mL；配制后121℃滅菌20min，將利用馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基培養(yǎng)好的Streptomyces?rimosus?M527和Streptomyces?aureofaciens?M930分別按5%（v/v）接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，在28℃±l℃條件下，搖床轉速180?r/min，發(fā)酵培養(yǎng)84?h；

（3）發(fā)酵結束后離心收集發(fā)酵液，加入等體積的乙酸乙酯，充分震蕩混勻，取上層，在真空條件下濃縮至浸膏；

（4）混合制劑配制：將Streptomyces?rimosus?M527和Streptomyces?aureofaciens?M930代謝產(chǎn)物用水溶解，混合，配成終濃度為0.08g/L?Streptomyces?rimosus?M527代謝產(chǎn)物和0.02g/L?Streptomyces?aureofaciens?M930代謝產(chǎn)物混合配方制劑。