[發明專利]trnH-psbA序列作為DNA條形碼在鑒定南湖菱中的應用及鑒定方法有效
| 申請號： | 201410509124.2 | 申請日： | 2014-09-28 |
| 公開（公告）號： | CN104293935A | 公開（公告）日： | 2015-01-21 |
| 發明（設計）人： | 李軍;李白;高廣春;黃嬛 | 申請（專利權）人： | 浙江省嘉興市農業科學研究院（所） |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224 | 代理人： | 胡紅娟 |
| 地址： | 314016 浙*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | trnh psba 序列 作為 dna 條形碼 鑒定 南湖 中的 應用 方法 | ||
【權利要求書】：
1.trnH-psbA序列作為DNA條形碼在鑒定南湖菱中的應用。
2.trnH-psbA序列作為DNA條形碼在制備鑒定南湖菱試劑盒中的應用。
3.一種鑒定南湖菱的方法，包括以下步驟：
利用PCR擴增待測樣品的trnH-psbA序列并進行測序，如果trnH-psbA序列的278bp堿基為A、308bp堿基為T，則判定待測樣品為南湖菱。
4.如權利要求3所述的方法，其特征在于：所述PCR擴增的反應體系為：
10×PCRbuffer，2μL；dNTP?mixture，0.5μL；10μM上游引物，0.5μL；10μM下游引物，0.5μL；樣品DNA1μL；Taq?DNA聚合酶，0.2μL；補充無菌水至20μL。
5.如權利要求3所述的方法，其特征在于：所述PCR擴增的引物對為：
上游引物：5’-TCCGCCCCTTACTTTCTTCC-3’
下游引物：5’-CGTAATGCTCACAACTTCCCT-3’。
6.如權利要求3所述的方法，其特征在于：所述PCR擴增的反應條件為：
94℃預變性5min；94℃變性30s，50℃退火30s，72℃延伸1min，共36個循環；72℃延伸10min；4℃保溫5min。
7.一種鑒定南湖菱的DNA條形碼，其特征在于，堿基序列如SEQ?ID?NO.1所示。
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