[發(fā)明專利]加強了基因簇表達的重組淀粉酶產(chǎn)色鏈霉菌及其構(gòu)建方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410506760.X | 申請日: | 2014-09-28 |
| 公開(公告)號: | CN104312967A | 公開(公告)日: | 2015-01-28 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 馬正;俞曉平;徐顯皓;陶立彬;申屠旭萍;邊亞琳;郝培應(yīng);許益鵬 | 申請(專利權(quán))人: | 中國計量學(xué)院 |
| 主分類號: | C12N1/21 | 分類號: | C12N1/21;C12N15/76;C12P19/40;C12R1/525 |
| 代理公司: | 杭州求是專利事務(wù)所有限公司 33200 | 代理人: | 林松海 |
| 地址: | 310018 浙江省*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 加強 基因 表達 重組 淀粉酶 產(chǎn)色鏈 霉菌 及其 構(gòu)建 方法 | ||
1.一種加強了基因簇toy?AM表達的重組淀粉酶產(chǎn)色鏈霉菌,其特征在于:它重組表達了生物合成豐加霉素的基因簇toy?AM,具有比保藏編號為?CGMCC?N0.2060?的淀粉酶產(chǎn)色鏈霉菌(Streptomyces?diastatochromogenes)?1628更高的豐加霉素表達能力;所述的基因簇toy?AM來自于待重組的原始菌淀粉酶產(chǎn)色鏈霉菌(Streptomyces?diastatochromogenes)1628;所述的基因簇toy?AM整合入原始菌淀粉酶產(chǎn)色鏈霉菌染色體。
2.?一種如權(quán)利要求1所述的加強了基因簇toy?AM表達的重組淀粉酶產(chǎn)色鏈霉菌的構(gòu)建方法,其特征在于,過程如下:
1)構(gòu)建表達載體pSET152-toy?AM;?
2)利用接合轉(zhuǎn)移法將所述的表達載體整合入淀粉酶產(chǎn)色鏈霉菌染色體,獲得所述的重組淀粉酶產(chǎn)色鏈霉菌。
3.如權(quán)利要求2所述的方法,其特征在于,利用載體pSET152實現(xiàn)基因簇toy?AM的過量表達,利用接合轉(zhuǎn)移法將載體pSET152-toy?AM特異性的整合入淀粉酶產(chǎn)色鏈霉菌(Streptomyces?diastatochromogenes)?1628的染色體,獲得了遺傳穩(wěn)定的的重組淀粉酶產(chǎn)色鏈霉菌;所述的加強了基因簇toy?AM表達的重組淀粉酶產(chǎn)色鏈霉菌的用途,將重組淀粉酶產(chǎn)色鏈霉菌進行發(fā)酵,與原始菌株相比,豐加霉素產(chǎn)量提高了4.5倍。
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