[發明專利]聚陽離子核酸復合物納米顆粒及制備方法、應用

在審

• 申請號: 201410504891.4
• 申請日: 2014-09-26
• 公開（公告）號: CN104257630A
• 公開（公告）日: 2015-01-07
• 發明（設計）人: 袁偉恩;陳順;車俊怡;原明璐
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: A61K9/51
• 分類號: A61K9/51;A61K47/34;A61K48/00;C08J3/24;A61P9/00;A61P27/02;C08L79/02
• 代理公司: 上海漢聲知識產權代理有限公司 31236
• 代理人: 胡晶

技術領域

本發明涉及治療血管增生藥物的技術領域，特別涉及一種治療血管增生的聚陽離子核酸復合物及制備方法、應用。

背景技術

新生血管可伴發于創傷修復、腫瘤生長、眼內缺血性病變等多種情況。新生血管的生成是一個相當復雜的生物學過程，目前的大量研究表明，血管內皮生長因子(vascular?endothelialgrowth?factor，VEGF)及其家族成員能特異性地促進內皮細胞分裂、增殖及遷移，在新生血管形成過程中起重要作用。

VEGF是一類糖蛋白，廣泛分布于人和動物體內的腦、腎、肝、脾、肺、骨骼等組織。人類成熟的VEGF以五種亞型存在——VEGFl21、VEGFl45、VEGFl65、VEGFl89、VEGF206，均系通過不同的剪接方式來自同一基因。除VEGF外，VEGF家族主要還包括胎盤生長因子(placenta?growth?factor，P1GF)、VEGF—B、VEGF—C、VEGF—D、VEGF—E，該些家族成員與VEGF具有相似的結構、功能及分布。

由于在新生血管生成中的重要作用，VEGF家族與新生血管生成相關性疾病及某些生理過程關系密切。VEGF家族在腫瘤新生血管的生成中起重要作用。

關于VEGF家族和眼內新生血管的研究表明，VEGF家族中VEGF在與缺氧有關的眼內新生血管化過程中起關鍵作用。在眼內新生血管活動眼中(糖尿病視網膜病變、視網膜中央靜脈阻塞等)，玻璃體內VEGF含量明顯增加。而在玻璃體內注射VEGF亦可誘導視網膜新生血管化。另外，臨床實驗發現抗VEGF療法可觀顯抑制眼內新生血管反應。

VEGF家族和胚胎血管生成VEGF在胚胎血管生成中起主導作用。現已證明，在人3個月孕早期和足月的胎盤中VEGF?mRNA即已存在。在動物實驗中發現，只要缺乏VEGF兩個等位基因中的任何1個，胚胎均最終死亡，原因是心血管系統形成失敗。

由于VEGF家族能明顯促進新生血管生成，故可從不同層次抑制其功能，來預防和治療新生血管相關性疾病。目前，抑制劑主要針對VEGF。

現有的抗VEGF抑制策略包括：

1)蛋白抗體可直接中和VEGF蛋白，從而抑制VEGF的生物效應。

2)可溶性VEGF受體能特異地結合VEGF，間接阻斷VEGF與其受體作用。

3)VEGF受體阻斷劑與VEGF受體結合，進而阻止其與VEGF作用，也起到了抑制VEGF的作用。

4)反義VEGF一組特異的核苷酸序列，能與VEGF?mRNA結合，干擾VEGFmRNA的翻譯和VEGF蛋白的生成。

5)VEGF信號傳導阻斷劑與VEGF受體結合后將產生受體自磷酸化等一系列信號傳導，通過阻斷傳導途徑，達到抑制VEGF作用的目的。

可特異性結合VEGFl65的制劑哌加他尼鈉(Pegaptanib，商品名Macugen)是最早獲批用于眼科的抗VEGF類藥物；此后，能廣泛結合VEGFl65及其他所有VEGF-A異構體的雷珠單抗(Ranibizumab，商品名Lucentis)相繼上市。這些抗VEGF制劑為治療新生血管及血管性疾病導致的黃斑水腫帶來革命性的改變。如果Ranibizumab的顯著療效是由于其廣泛結合所有VEGF-A異構體而非僅僅結合VEGF165，那么廣譜結合VEGF家族所有成員的藥物則有望獲得更好療效。能廣譜作用于VEGF家族成員的新一代抗VEGF藥物阿柏西普(Aflibercept，眼用制劑VEGF?Trap-Eye，商品名Eylea)已于2011年11月上市。

雖然單抗藥物已經取得一系列臨床治療作用，但仍存在不少問題，比如單抗的靶點單一，目前僅針對VEGF165，對于其他VEGF亞型缺乏針對性。且單抗的研發成本高，周期長，制備成本高。

siRNA是一段21－25個堿基對的RNA分子，發現于單細胞生物抵御病毒侵襲的機制。單細胞生物針對入侵病毒的mRNA序列合成出一段與之互補的siRNA，主動結合mRNA，從而阻斷病毒的復制。siRNA因其獨特的靶點特異性、結構可設計性和代謝安全性，成為科研界普遍看好的新的治療藥物。然而，在過去的20年里，研究人員設計了一系列的載體用于siRNA的體內輸送，但僅有極少數進入臨床階段，迄今，仍未有一個載體得到FDA認證，一個有效載體的缺位，導致核酸物質體內輸送仍然處于臨床瓶頸期。