[發(fā)明專利]一種蜜環(huán)菌濃縮液的質(zhì)量控制方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410502761.7
• 申請(qǐng)日: 2014-09-26
• 公開（公告）號(hào): CN104316699A
• 公開（公告）日: 2015-01-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周美娟;胡浩武;杜育華;袁桂平;梅玲華;耿炤;姜偉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江西匯仁藥業(yè)有限公司;上海中創(chuàng)醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68
• 代理公司: 北京華科聯(lián)合專利事務(wù)所(普通合伙) 11130
• 代理人: 王為;孟旭

1.一種蜜環(huán)菌濃縮液的檢測(cè)方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：蜜環(huán)菌濃縮液性狀的觀察，蜜環(huán)菌濃縮液的鑒別，蜜環(huán)菌濃縮液的檢查，對(duì)蜜環(huán)菌濃縮液含有的成分進(jìn)行含量測(cè)定。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，其中，蜜環(huán)菌濃縮液性狀的觀察，步驟是：本品為棕黃至棕褐色澄清液體，味微酸、苦、微甜。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，其中，蜜環(huán)菌濃縮液的鑒別，步驟是：

鑒別1：取本品數(shù)滴于濾紙上，噴以茚三酮試液，烘干后顯藍(lán)紫色或紫紅色斑點(diǎn)，

鑒別2：取本品約1.0ml，加水10ml，搖勻，取2ml，加5％α-萘酚乙醇液數(shù)滴，搖勻，沿壁加入濃硫酸1ml，在兩液面交界處顯紫紅色環(huán)，

鑒別3：取本品約15ml，置分液漏斗中，加乙醚分兩次萃取，合并萃取液，揮干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，做為供試品溶液，取5-羥甲基糖醛對(duì)照品適量，制成1mg/ml的對(duì)照品溶液，以上兩溶液各10ul分別點(diǎn)于同一硅膠GF254板上，以石油醚(60-90℃)-乙酸乙酯-氯仿(2：2：1)為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，其中，蜜環(huán)菌濃縮液的檢查，步驟是：

相對(duì)密度：具體操作均符合《中國(guó)藥典》通則項(xiàng)下相關(guān)要求，本品的相對(duì)密度應(yīng)為1.030～1.035(20℃)，

pH值：具體操作符合《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄ⅦG，pH值應(yīng)為4.0～5.5，

水中不溶物：精密量取本品10ml，置恒重的離心管中，以4000rpm的轉(zhuǎn)速離心15分鐘后，棄去上清液，沉淀在105℃干燥至恒重(按《中國(guó)藥典》201年版一部附錄)，減失重量大于0.5％，不得過3.0％，微生物限度：照中國(guó)藥典2010年版一部附錄ⅩⅢC檢查，應(yīng)符合規(guī)定。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，其中，對(duì)蜜環(huán)菌濃縮液含有的成分進(jìn)行含量測(cè)定，步驟是：

對(duì)照品溶液制備：取牛血清白蛋白加水制成每1ml含0.3mg的溶液，即得，

標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：精密量取對(duì)照品溶液0.0ml(0號(hào)管)、0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml，分別置具塞試管中，各加水至1.0ml，再加堿性銅試液1.0ml，搖勻，室溫放置10分鐘后，加入福林試液(取儲(chǔ)備液1→16)4.0ml，搖勻，于55℃水浴中保溫5分鐘，取出，放冷至室溫，以0管為空白，照分光光度法(《中國(guó)藥典》一部附錄ⅤA)，在650nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，

測(cè)定法：精密稱取本品1.0-5.0g，置100ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，得稀釋液，精密量取稀釋液1.0ml，再加堿性銅試液1.0ml，搖勻，室溫放置10分鐘后，加入福林試液(取儲(chǔ)備液1→16)4.0ml，搖勻，于55℃水浴中保溫5分鐘，取出，放冷至室溫，以0管為空白，照分光光度法(《中國(guó)藥典》一部附錄ⅤA)，在650nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中含牛血清白蛋白的重量，計(jì)算，即得。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，其中，鑒別的多糖、氨基酸、5-羥甲基糠醛的方法可以采取液相、薄層、理化反應(yīng)方法。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，其中，待檢樣品取樣量為2.5g。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，其中，

蜜環(huán)菌濃縮液性狀的觀察，步驟是：本品為棕黃至棕褐色澄清液體，味微酸、苦、微甜；

其中，蜜環(huán)菌濃縮液的鑒別，步驟是：

鑒別1：取本品數(shù)滴于濾紙上，噴以茚三酮試液，烘干后顯藍(lán)紫色或紫紅色斑點(diǎn)，

鑒別2：取本品約1.0ml，加水10ml，搖勻，取2ml，加5％α-萘酚乙醇液數(shù)滴，搖勻，沿壁加入濃硫酸1ml，在兩液面交界處顯紫紅色環(huán)，

鑒別3：取本品約15ml，置分液漏斗中，加乙醚分兩次萃取，合并萃取液，揮干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，做為供試品溶液，取5-羥甲基糖醛對(duì)照品適量，制成1mg/ml的對(duì)照品溶液，以上兩溶液各10ul分別點(diǎn)于同一硅膠GF254板上，以石油醚(60-90℃)-乙酸乙酯-氯仿(2：2：1)為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)；

其中，蜜環(huán)菌濃縮液的檢查，步驟是：

相對(duì)密度：具體操作均符合《中國(guó)藥典》通則項(xiàng)下相關(guān)要求，本品的相對(duì)密度應(yīng)為1.030～1.035(20℃)，

pH值：具體操作符合《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄ⅦG，pH值應(yīng)為4.0～5.5，

水中不溶物：精密量取本品10ml，置恒重的離心管中，以4000rpm的轉(zhuǎn)速離心15分鐘后，棄去上清液，沉淀在105℃干燥至恒重(按《中國(guó)藥典》201年版一部附錄)，減失重量大于0.5％，不得過3.0％，微生物限度：照中國(guó)藥典2010年版一部附錄ⅩⅢC檢查，應(yīng)符合規(guī)定；

其中，對(duì)蜜環(huán)菌濃縮液含有的成分進(jìn)行含量測(cè)定，步驟是：

對(duì)照品溶液制備：取牛血清白蛋白加水制成每1ml含0.3mg的溶液，即得，

標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：精密量取對(duì)照品溶液0.0ml(0號(hào)管)、0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml，分別置具塞試管中，各加水至1.0ml，再加堿性銅試液1.0ml，搖勻，室溫放置10分鐘后，加入福林試液(取儲(chǔ)備液1→16)4.0ml，搖勻，于55℃水浴中保溫5分鐘，取出，放冷至室溫，以0管為空白，照分光光度法(《中國(guó)藥典》一部附錄ⅤA)，在650nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，

測(cè)定法：精密稱取本品約1.0-5.0g，置100ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，得稀釋液，精密量取稀釋液1.0ml，再加堿性銅試液1.0ml，搖勻，室溫放置10分鐘后，加入福林試液(取儲(chǔ)備液1→16)4.0ml，搖勻，于55℃水浴中保溫5分鐘，取出，放冷至室溫，以0管為空白，照分光光度法(《中國(guó)藥典》一部附錄ⅤA)，在650nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中含牛血清白蛋白的重量，計(jì)算，即得。